發(fā)布時間：2018-09-08 20:25

【摘要】：隨著肉雞養(yǎng)殖規(guī)模化和集約化的發(fā)展,肉雞的生產(chǎn)性能得到顯著提升的同時,肉雞腿病發(fā)生率在我國呈顯著上升的趨勢,嚴(yán)重影響了肉雞養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益和動物福利。肉雞腿病種類眾多,常見的包括脛骨發(fā)育不良(Tibialdyschondroplasia,TD),股骨頭壞死(femoralheadnecrosis,FHN),佝僂病(Rickets)等。而在眾多腿病中,股骨頭壞死常導(dǎo)致患雞跛行而不能正常飲水和采食,影響尤為重大。股骨頭壞死發(fā)生機理比較復(fù)雜,目前尚無定論,由于干骺端軟骨細胞的凋亡會影響股骨頭血液灌流,從而導(dǎo)致股骨頭因缺乏營養(yǎng)供應(yīng)而壞死,因此本試驗從細胞凋亡的角度出發(fā)嘗試探討該病可能的發(fā)生機理。堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在成骨細胞內(nèi)合成并儲存,它對骨細胞的前期增殖發(fā)揮有效的刺激作用的同時也對軟骨細胞有著抗凋亡的作用。目前有關(guān)bFGF對骨細胞凋亡以及進而導(dǎo)致肉雞FHN發(fā)生的報道鮮有所見。本研究的目的在于對我國規(guī)模化肉雞養(yǎng)殖場肉雞腿病的發(fā)生情況進行調(diào)查,同時對在肉雞FHN發(fā)生中bFGF的作用及其對肉雞軟骨細胞凋亡的影響進行了探討。1、規(guī)模養(yǎng)殖場肉雞腿病情況調(diào)查對安徽省某集團公司9個肉雞養(yǎng)殖場進行肉雞腿病流行病學(xué)調(diào)查,并根據(jù)已有的肉雞步態(tài)評分方法對發(fā)病肉雞進行步態(tài)評分;然后,隨機選取10只發(fā)病肉雞進行撲殺,并在每個養(yǎng)殖場取10只正常肉雞作對照,對撲殺的肉雞進行病理剖檢和骨組織采樣,取病料進行微生物學(xué)檢測和病理組織學(xué)觀察;最后,結(jié)合各種診斷結(jié)果對樣品中每只肉雞腿病的類型作出診斷,并對所有的腿病進行分類、統(tǒng)計和分析。結(jié)果:肉雞腿病發(fā)病率為2.07%,癥狀輕微的肉雞占發(fā)病雞總量的50.92%,有明顯跛行的肉雞占發(fā)病雞總量的20.66%,喪失行走能力的占28.42%。實驗室診斷發(fā)現(xiàn),導(dǎo)致肉雞跛行的主要病因是細菌感染,占發(fā)病雞總量的36.67%;在非細菌感染病例中,TD占發(fā)病雞比重最高,達到34.44%,而FHN占發(fā)病雞總量的13.33%;此外,外傷骨折和部分未知原因發(fā)生腿病的肉雞分別占發(fā)病雞總量的6.67%和8.89%。2、bFGF在自然發(fā)病肉雞股骨頭壞死中的作用機理研究選取100只健康的1日齡Ross308白羽肉雞為試驗動物,自由采食飼養(yǎng),42日齡后將所有的雞稱重并處死。通過剖檢觀察股骨頭完整性以及股骨生長板形態(tài)變化并進行FHN評分,并分別對肝指數(shù)、軟骨細胞細胞凋亡數(shù)量、bFGF和凋亡相關(guān)基因的表達、骨長、骨指數(shù)、骨強度、骨密度和骨灰分進行測定。結(jié)果發(fā)現(xiàn),FHN發(fā)病率為20.9%;肉雞在體重、肝指數(shù)、骨長、骨重、骨強度和骨密度上差異不顯著,FHN肉雞脛骨灰分重占干重比明顯低于未發(fā)生腿病肉雞,股骨頭軟骨細胞脂肪空泡數(shù)量和凋亡數(shù)量都明顯高于未發(fā)生腿病肉雞,但靜止區(qū)軟骨細胞數(shù)量上,未發(fā)生腿病肉雞與FHN差異不顯著;FHN肉雞股骨頭生長板bFGF蛋白表達量明顯低于未發(fā)生腿病肉雞,Bax和caspases-3的RNA表達量顯著升高,bFGF和Bcl-2 RNA表達量顯著降低。上述結(jié)果表明,生長板軟骨細胞凋亡在肉雞FHN發(fā)生的過程中扮演著重要的角色,而bFGF通過調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)基因的表達介導(dǎo)軟骨細胞凋亡并進而影響著肉雞FHN的發(fā)生。
[Abstract]:With the development of large-scale and intensive broiler breeding, the production performance of broilers has been significantly improved. At the same time, the incidence of broiler leg disease in China is increasing significantly, seriously affecting the economic benefits and animal welfare of broiler breeding. Femoral head necrosis (FHN), rickets and so on. In many leg diseases, femoral head necrosis often leads to lameness of chickens and can not normally drink and eat, the impact is particularly significant. In this study, we attempted to explore the possible mechanism of osteoporosis from the point of view of cell apoptosis. Basic fibroblast growth factor (bFGF) is synthesized and stored in osteoblasts, which plays an effective role in stimulating the early proliferation of osteoblasts. The purpose of this study is to investigate the occurrence of broiler leg disease in large-scale broiler farms in China, and to investigate the role of bFGF in the development of broiler FHN and its effect on broiler softness. The effect of osteocyte apoptosis was discussed. 1. Investigation of broiler leg disease in large-scale farms carried out epidemiological investigation of broiler leg disease in 9 broiler farms of a group company in Anhui Province. Gait score was made according to the existing gait score method of broiler chickens. Then, 10 broiler chickens were randomly selected for culling, and each chicken was culled. Ten normal broilers were selected as control, and the culled broilers were examined by pathological dissection and bone tissue sampling, and the pathogenic materials were examined by microbiology and pathological histology. Finally, the types of leg diseases in each broiler were diagnosed according to various diagnostic results, and all leg diseases were classified, statistically analyzed. The incidence of leg disease was 2.07%. The mild symptoms of broilers accounted for 50.92% of the total chickens. The obvious lameness of broilers accounted for 20.66% of the total chickens. The loss of walking ability accounted for 28.42%. The highest proportion of chickens was 34.44%, while FHN accounted for 13.33% of the total chickens. In addition, 6.67% and 8.89% of the total chickens suffered from traumatic fracture and some unknown leg disease respectively. 2. The mechanism of bFGF in the necrosis of femoral head in naturally occurring broilers. 100 healthy 1-day-old Ross 308 white-feathered broilers were selected as experimental animals. After feeding, all chickens were weighed and killed at 42 days of age. The integrity of femoral head and morphological changes of femoral growth plate were observed by dissection and FHN score was performed. The liver index, the number of chondrocyte apoptosis, the expression of bFGF and apoptosis-related genes, bone length, bone index, bone strength, bone density and bone ash were measured. The results showed that the incidence of FHN was 20.9%. There was no significant difference in body weight, liver index, bone length, bone weight, bone strength and bone mineral density among broilers. The expression of bFGF protein in the growth plate of the femoral head of FHN broilers was significantly lower than that of the broilers without leg disease. The expression of Bax and caspases-3 RNA was significantly increased, while the expression of bFGF and Bcl-2 RNA was significantly decreased. BFGF plays an important role in inducing chondrocyte apoptosis by regulating the expression of apoptosis-related genes, which in turn affects the occurrence of FHN in broilers.
【學(xué)位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S858.31

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本文編號：2231603