【摘要】：為建立EBOV抗體間接ELISA檢測(cè)方法,以純化后的EBOV糖蛋白作為包被抗原,HRP標(biāo)記山羊抗馬IgG為二抗,EBOV陽(yáng)性馬血清和陰性馬血清分別為陽(yáng)、陰性對(duì)照,優(yōu)化反應(yīng)條件,以EBOV病毒樣顆粒免疫獲得的高免馬血清評(píng)價(jià)其特異性和敏感性,并將檢測(cè)結(jié)果與基于假病毒的中和抗體檢測(cè)結(jié)果相比較,進(jìn)一步評(píng)價(jià)EBOV抗體ELISA檢測(cè)方法在EBOV免疫血清抗體水平檢測(cè)中的應(yīng)用。優(yōu)化后的間接ELISA方法可特異性檢測(cè)EBOV抗體,與西尼羅病毒等的陽(yáng)性血清均不發(fā)生反應(yīng),檢測(cè)結(jié)果與基于假病毒的中和抗體檢測(cè)結(jié)果相平行。批內(nèi)、批間試驗(yàn)變異系數(shù)均小于8%。本研究成功建立了EBOV抗體間接ELISA檢測(cè)方法,為EBOV免疫血清抗體水平檢測(cè)提供了一種簡(jiǎn)便、快速的檢測(cè)方法。
[Abstract]:In order to establish an indirect ELISA detection method for EBOV antibody, the purified EBOV glycoprotein was used as the coated antigen to label goat anti-EBOV positive horse serum and negative equine serum as positive and negative control respectively, and the reaction conditions were optimized. The specificity and sensitivity of EBOV virus-like immunized high immune horse serum were evaluated, and the results were compared with those of neutralizing antibody based on pseudovirus. To further evaluate the application of EBOV antibody ELISA assay in the detection of EBOV immune serum antibody. The optimized indirect ELISA method can specifically detect EBOV antibody, but does not react with the positive serum of West Nile virus, which is parallel to the result of neutralizing antibody detection based on pseudovirus. The coefficient of variation was less than 8. In this study, the indirect ELISA detection method of EBOV antibody was successfully established, which provided a simple and rapid method for the detection of antibody level of EBOV immunized serum.
【作者單位】： 中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所吉林省人獸共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;長(zhǎng)春西諾生物科技有限公司;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;中國(guó)科學(xué)院微生物研究所;
【基金】：國(guó)家新藥創(chuàng)制重大專項(xiàng)(2015ZX09102025)
【分類號(hào)】：S852.4

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本文編號(hào)：2227704