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無乳鏈球菌恒溫熱隔絕式PCR快速檢測方法的建立

發(fā)布時間:2018-09-06 16:27
【摘要】:為建立快速檢測無乳鏈球菌的方法,本研究針對無乳鏈球菌表面免疫原性蛋白sip基因的保守區(qū)域設計特異性引物,建立了快速檢測無乳鏈球菌的恒溫熱隔絕式PCR(iiPCR)方法。該檢測方法能在30 min內(nèi)迅速擴增出大量大小為105 bp的目的條帶;并與肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、乳房鏈球菌、停乳鏈球菌均無交叉反應;檢測下限為10~2拷貝/μL,優(yōu)于普通PCR方法。本研究建立的檢測方法具有操作簡便、高特異性、高敏感性及高擴增效率的特點,適用臨床或基層實驗室使用。
[Abstract]:In order to establish a method for rapid detection of streptococcus lactobacillus, we designed specific primers for the conserved region of the surface immunogenicity protein (sip) gene of Streptococcus lactobacillus, and established a fast PCR (iiPCR) method for rapid detection of Streptococcus lactobacillus by thermostatic isolation. This method could rapidly amplify a large number of target bands of 105 bp in 30 min, and had no cross reaction with Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Streptococcus Breast, Streptococcus Breast and Streptococcus lactis. The detection limit is 10 ~ 2 copies / 渭 L, which is superior to the conventional PCR method. This method has the characteristics of simple operation, high specificity, high sensitivity and high amplification efficiency.
【作者單位】: 廣東海大畜牧獸醫(yī)研究院有限公司;華南農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)學院;
【基金】:廣東省科技計劃項目(2014A020208052) 廣州市科技計劃項目(201510010250)
【分類號】:S852.61

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本文編號:2226905

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