【摘要】：為探究表達(dá)豬流行性腹瀉病毒(PEDV)纖突糖蛋白(S1)的重組乳酸乳球菌口服免疫動物誘導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答,本研究從PEDV SDLY株中擴增得到S1基因序列,構(gòu)建pMG36e-S1重組質(zhì)粒并將其電轉(zhuǎn)至乳酸乳球菌MG1363感受態(tài)細(xì)胞中,制備表達(dá)豬流行性腹瀉病毒S1蛋白的重組乳酸乳球菌。應(yīng)用SDS-PAGE、Western-blot鑒定目的蛋白的表達(dá)。將重組菌口服免疫新西蘭大白兔,中和試驗檢測小腸黏膜和血清中的中和抗體效價,間接ELISA方法測定血清中特異性IgG。結(jié)果顯示,該重組菌能夠有效引起動物體產(chǎn)生較高水平血清IgG和一定量的黏膜免疫中和抗體,表明該重組菌表達(dá)系統(tǒng)能刺激動物系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,具有作為口服疫苗的潛在應(yīng)用價值。
[Abstract]:In order to investigate the specific immune response induced by oral immunization of recombinant Lactococcus lactis with (PEDV) fibrin glycoprotein (S1) of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV SDLY), the S1 gene sequence was amplified from PEDV SDLY strain. PMG36e-S1 recombinant plasmid was constructed and electroporated into MG1363 competent cells of Lactococcus lactis to prepare recombinant Lactococcus lactis expressing S1 protein of porcine epidemic diarrhea virus. The expression of the target protein was identified by SDS-PAGEN Western-blot. New Zealand white rabbits were immunized with recombinant bacteria orally. Neutralizing antibody titers in small intestinal mucosa and serum were detected by neutralization test and specific IgG in serum were determined by indirect ELISA method. The results showed that the recombinant bacteria could effectively induce the production of high levels of serum IgG and a certain amount of mucosal immune neutralizing antibodies in animals, indicating that the recombinant bacteria expression system could stimulate the immune response of the animal system. It has potential application value as oral vaccine.
【作者單位】： 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;
【基金】：山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目(SDAIT-06-022-08) 青島市民生科技計劃項目(16-6-2-42-nsh)
【分類號】：S852.651

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本文編號：2192061