本文選題：旋毛蟲 + T基因　； 參考：《中國獸醫(yī)學報》2017年04期

【摘要】：旋毛蟲抗原基因T668是本實驗室發(fā)現(xiàn)的1條高反應原性的特異性抗原基因,該基因編碼旋毛蟲絲氨酸蛋白酶。本試驗利用重疊PCR的方法對旋毛蟲抗原基因T668成功實現(xiàn)酶活性中心重要位點定點突變改造,將酶活性中心的結合位點259位親水性絲氨酸和催化三聯(lián)體中240位的絲氨酸分別突變?yōu)槭杷员彼?并構建、純化了可溶性表達的雙位點突變的重組蛋白,后經(jīng)Western blot分析表明所表達的重組蛋白能夠與旋毛蟲感染26d陽性血清發(fā)生特異性反應,具有良好的反應原性。本試驗為后續(xù)開展對該絲氨酸蛋白酶的研究及應用奠定了堅實的基礎。
[Abstract]:Trichinella spiralis antigen gene T668 is a highly reactive specific antigen gene which encodes serine protease of Trichinella spiralis. In this experiment, the gene T668 of Trichinella spiralis antigen was successfully transformed into a site-directed mutation at an important site of the enzyme active center by overlapping PCR. The binding site 259 of the enzyme active center and the 240 position serine of the catalytic triad were mutated to hydrophobic alanine, respectively, and the soluble recombinant protein with double site mutation was constructed and purified. Western blot analysis showed that the expressed recombinant protein could react specifically with the positive serum of Trichinella spiralis for 26 days. This experiment laid a solid foundation for the further research and application of the serine protease.
【作者單位】： 吉林大學人獸共患病研究所;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(31520103916)
【分類號】：S852.7

【相似文獻】

相關期刊論文 前6條

1 李和剛;傅田;靳二輝;操繼躍;李奎;肖邦;楊述林;;豬IκBα基因定點突變中兩種方法的應用[J];中國畜牧獸醫(yī);2009年01期

2 周繼昌;李黛淋;湯加勇;趙華;劉小立;朱玉梅;徐健;;硒蛋白Sep15基因克隆、定點突變及其原核表達[J];中國生物工程雜志;2011年08期

3 楊斐斐;劉新峰;葛秀國;丁向彬;宋桂敏;李光鵬;郭宏;;牛Dgat1基因高GC含量片段的定點突變[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2012年06期

4 朱玲;徐志文;郭萬柱;胡秋炅;王印;王小玉;;PPV SC-1株VP2蛋白Cys-402、214的定點突變對VLPs的影響[J];中國獸醫(yī)學報;2010年03期

5 劉明明;賈立軍;薛書江;梁晚楓;張守發(fā);;豬嗜血支原體OxaA基因的同義定點突變、克隆及在Vero細胞中的表達[J];中國預防獸醫(yī)學報;2013年07期

6 ;[J];;年期

相關碩士學位論文 前2條

1 張江業(yè);山羊溶酶體AMA的定點突變及突變產(chǎn)物對SW敏感性研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2014年

2 龍民慧;旋毛蟲新生幼蟲脫氧核糖核酸酶Ⅱ表達及鑒定[D];吉林大學;2005年

，

本文編號：2101457