本文選題：番鴨細(xì)小病毒 + 鴨甲肝病毒��； 參考：《廣西大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：番鴨細(xì)小病毒病是由番鴨細(xì)小病毒(MDPV)引起的引起的主要感染三周齡以內(nèi)雛番鴨的一種病毒性傳染病,雛鴨感染后可產(chǎn)生腸道卡他性炎癥、拉稀腹瀉、兩腳發(fā)軟等癥狀,嚴(yán)重危害了番鴨飼養(yǎng)業(yè)的發(fā)展。目前,番鴨細(xì)小病毒病在我國(guó)福建、廣東、廣西等主要番鴨飼養(yǎng)區(qū)廣泛流行。鴨甲型病毒性肝炎是由鴨甲肝炎病毒(DHAV)引起的一種傳染性強(qiáng)致死率高的傳染病,主要侵害三周齡以內(nèi)雛鴨。DHAV根據(jù)血清型分為DHAV-1型、DHAV-2型和DHAV-3型,分別對(duì)應(yīng)于原來的血清Ⅰ型DHV、最早發(fā)現(xiàn)于臺(tái)灣的“新型DHV”和最早發(fā)現(xiàn)于韓國(guó)的“新型DHV”。隨著我國(guó)養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展,鴨肝炎的發(fā)病率和死亡率越來越高,嚴(yán)重制約了養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展。近年來,在我國(guó)流行的DHAV主要為DHAV-1和DHAV-3。為從分子水平上了解廣西流行株MDPV和DHAV-3的遺傳變化規(guī)律,本研究應(yīng)用PCR方法擴(kuò)增了廣西分離株MDPV GX2011-5和DHAV-3GXLZ07的不同核酸片段,對(duì)其進(jìn)行了全基因組序列測(cè)定與分析。結(jié)果表明,GX2011-5全基因序列與GeneBank公布的其他MDPV株的相似性介于90.5%～94.3%之間,與上海SAAS-SHNH株的相似性最高,與匈牙利FM株的相似性為最低；與鵝細(xì)小病毒(Goose Parvovirus, GPV)的相似性介于81.4%～91.4%之間,其中與重慶DY株相似性最高,與匈牙利Virulent B株相似性最低。GXLZ07株全基因序列與DHAV-3其它毒株全基因序列相似性介于95.1～99.3%之間,與福建G株相似性最高,與北京B63株相似性最低。根據(jù)GenBank中鴨甲肝病毒1型(DHAV-1)的3C基因和DHAV-3的VP0基因分別設(shè)計(jì)了2對(duì)特異性引物,并優(yōu)化擴(kuò)增條件,建立了鑒別DHAV-1和DHAV-3二重二溫式RT-PCR的檢測(cè)方法。該方法特異性好,對(duì)其他鴨病原體無特異性擴(kuò)增。該方法的敏感性高,對(duì)DHAV-1的核酸最小檢測(cè)量為4.9g,對(duì)DHAV-3的為7.5ng。應(yīng)用該方法對(duì)53份疑似病料進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果DHAV-1 P日性3份,DHAV-3陽(yáng)性2份,表明建立的方法適用于臨床樣品檢測(cè)的應(yīng)用。根據(jù)GenBank中鴨DHAV-1的3C基因、DHAV-3的VP0基因和MDPV的NS基因分別設(shè)計(jì)了3對(duì)特異性引物,并優(yōu)化擴(kuò)增條件,建立了DHAV-1V DHAV-3和MDPV多重PCR的檢測(cè)方法。該方法特異性好,對(duì)其他鴨病原體無特異性擴(kuò)增。該方法的敏感性高,對(duì)DHAV-1的核酸最小檢測(cè)量為5.2pg,對(duì)DHAV-3的為7.9pg,對(duì)MDPV的為5.8pg。應(yīng)用該方法對(duì)53份疑似病料進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果DHAV-1陽(yáng)性3份,DHAV-3陽(yáng)性2份,MDPV陽(yáng)性5份,說明該方法很適用于DHAV-1、DHAV-3和MDPV的鑒別和診斷。
[Abstract]:Muscovy duck parvovirus (MDPV) is a kind of viral infection caused by muscovy duck parvovirus (MDPV), which mainly infects young muscovy ducks within three weeks of age. It seriously endangers the development of muscovy duck breeding. At present, muscovy duck parvovirus is prevalent in Fujian, Guangdong and Guangxi. Duck viral hepatitis A (DHAV) is a highly infectious disease caused by duck hepatitis A virus (DHAV), which mainly infects ducklings within three weeks of age. It is divided into two serotypes: DHAV-1, DHAV-2 and DHAV-3. Corresponding to the original serum type I DHVs, the "new DHV" was first found in Taiwan and the "new-type DHV" in Korea. With the development of duck breeding in China, the morbidity and mortality of duck hepatitis are higher and higher, which seriously restricts the development of duck breeding. In recent years, the popular DHAV in China are DHAV-1 and DHAV-3. In order to understand the genetic variation of MDPV and DHAV-3 in Guangxi at molecular level, different nucleic acid fragments of Guangxi isolates MDPV GX2011-5 and DHAV-3GXLZ07 were amplified by PCR, and their whole genome sequence was determined and analyzed. The results showed that the similarity between GX2011-5 gene sequence and other MDPV strains published by GeneBank ranged from 90.5% to 94.3%, the similarity with Shanghai SAAS-SHNH strain was the highest, and the similarity between GX2011-5 gene sequence and Hungarian FM strain was the lowest. The similarity between GPV and Goose Parvovirus (GPV) was between 81.4% and 91.4%, among which, the similarity with DY strain in Chongqing was the highest, and that with virus B strain in Hungary was the lowest. The total gene sequence of GXLZ07 strain was between 95.1and 99.3% with that of DHAV-3 strain. The similarity was the highest with G strain in Fujian and the lowest with B63 strain in Beijing. Two pairs of specific primers were designed according to the 3C gene of DHAV-1 and the VP0 gene of DHAV-3 in GenBank, and the amplification conditions were optimized. A double temperature RT-PCR method was established for the identification of DHAV-1 and DHAV-3. The method has good specificity and has no specific amplification to other duck pathogens. The sensitivity of this method is high, the minimum detection of DHAV-1 nucleic acid is 4.9 g, and that of DHAV-3 is 7.5 ng. This method was used to detect 53 suspected samples. The results showed that 3 DHAV-1 P samples were positive for DHAV-3, which indicated that the established method was suitable for clinical sample detection. According to DHAV-1 3C gene, DHAV-3 VP0 gene and MDPV NS gene in GenBank, three pairs of specific primers were designed, and the amplification conditions were optimized. A method for the detection of DHAV-1V DHAV-3 and MDPV multiplex PCR was established. The method has good specificity and has no specific amplification to other duck pathogens. The sensitivity of this method is high, the minimum detection of nucleic acid for DHAV-1 is 5.2 PG, for DHAV-3 is 7.9 PG, for MDPV is 5.8 PG. 53 suspected samples were detected by this method. The results showed that 3 DHAV-1 positive and 2 DHAV-3 positive cases were MDPV positive, which indicated that this method was suitable for the differential diagnosis and diagnosis of DHAV-1 and DHAV-3 and MDPV.
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S852.65

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 郭蘭萍;蘇兆眾;羅祖玉;陳濤生;欒穎;蒲小紅;;惡性轉(zhuǎn)化增加細(xì)胞對(duì)細(xì)小病毒的敏感性[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;1988年03期

2 李發(fā)志,葉鐘灼;兔細(xì)小病毒肺炎的診斷與防治[J];四川動(dòng)物;1990年01期

3 Anderson L;趙洪禮;;人類細(xì)小病毒[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1991年04期

4 劉明慧;石踐;單振振;袁寶;任文陟;;貓細(xì)小病毒的分離與鑒定[J];吉林畜牧獸醫(yī);2008年10期

5 汪曉鄆;時(shí)坤;刁燕;尹茉莉;馮海峰;杜銳;;鹿源細(xì)小病毒的分離與鑒定[J];經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào);2009年01期

6 靳小霞;孫兆增;曾林;王化磊;王鐵成;楊松濤;夏咸柱;;猴源細(xì)小病毒血凝和血凝抑制試驗(yàn)的優(yōu)化與應(yīng)用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2011年06期

7 劉碧濤;任常寶;張曉戰(zhàn);許冬蕾;鄭良焰;唐兆新;;貓細(xì)小病毒的分離與鑒定[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年09期

8 蘇兆眾;羅祖玉;;哺乳動(dòng)物及人自主性細(xì)小病毒研究概況[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1987年03期

9 蘇兆眾,羅祖玉,郭蘭萍;用細(xì)小病毒-人細(xì)胞系統(tǒng)檢測(cè)低劑量基因毒物的致突性[J];科學(xué)通報(bào);1988年01期

10 羅祖玉,王順德,王健,劉為平;細(xì)小病毒核苷酸序列同源性的比較——對(duì)抗癌作用的一點(diǎn)啟示[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1990年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 楊松濤;王淑君;馮浩;張仁舟;曾林;夏志平;鄒嘯環(huán);王承宇;連海;孫兆增;孟軻音;王澤;夏咸柱;;猴源細(xì)小病毒的分離鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)小動(dòng)物醫(yī)學(xué)分會(huì)第四次學(xué)術(shù)研討會(huì)、中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)外科學(xué)分會(huì)第十六次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（1）[C];2009年

2 楊松濤;王淑君;馮浩;張仁舟;曾林;夏志平;鄒嘯環(huán);王承宇;連海;孫兆增;孟軻音;王澤;夏咸柱;;猴源細(xì)小病毒的分離鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第七屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2009年

3 楊松濤;喬軍;謝之景;趙忠鵬;戈銳;王鐵成;馮娜;夏咸柱;;肉食獸細(xì)小病毒研究概述[A];全國(guó)獸醫(yī)外科學(xué)第13次學(xué)術(shù)研討會(huì)、小動(dòng)物醫(yī)學(xué)第1次學(xué)術(shù)研討會(huì)暨奶牛疾病第3次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2006年

4 閆喜軍;張海玲;陳濤;柴秀麗;趙建軍;羅國(guó)良;吳威;邵西群;;肉食獸細(xì)小病毒分子流行病學(xué)研究[A];首屆中國(guó)獸藥大會(huì)——獸醫(yī)生物制品學(xué)、獸醫(yī)微生物學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文集（2008）[C];2008年

5 盧悅;王貴升;田夫林;;水貂細(xì)小病毒檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

6 謝之景;夏咸柱;扈榮良;葉俊華;黃耕;徐黎;趙忠鵬;馬長(zhǎng)書;徐玉生;;犬細(xì)小病毒基因型的調(diào)查研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下）[C];2003年

7 張?jiān)?胡奇林;童光志;相文華;;鵝和番鴨細(xì)小病毒全基因克隆與序列分析[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)成立大會(huì)暨第一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

8 閆喜軍;張海玲;陳濤;柴秀麗;趙建軍;羅國(guó)良;吳威;王鳳雪;邵西群;;水貂腸炎細(xì)小病毒分子流行病學(xué)研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第七次研討會(huì)論文集[C];2008年

9 謝麗基;謝芝勛;鄧顯文;謝志勤;龐耀珊;范晴;劉加波;;鴨Ⅰ型肝炎病毒和番鴨細(xì)小病毒二重?zé)晒舛縍T-PCR方法的建立[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十六次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

10 陳春花;鄧同煒;李文剛;張桂云;;鴿子疑似細(xì)小病毒的診斷[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)會(huì)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2000年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 本報(bào)記者 李嬋;販狗陷阱藏疾患風(fēng)險(xiǎn)[N];北京科技報(bào);2011年

2 ;夏季幼貂該如何管理[N];吉林農(nóng)村報(bào);2008年

3 王華;仔貂的前期管理[N];瓜果蔬菜報(bào).農(nóng)業(yè)信息周刊;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 毛亞萍;水貂腸炎細(xì)小病毒致病株的分離及VP2蛋白部分關(guān)鍵氨基酸位點(diǎn)的功能研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 李雪梅;鵝細(xì)小病毒和番鴨細(xì)小病毒部分基因組克隆、序列分析及VP2-VP3基因的表達(dá)[D];中國(guó)人民解放軍軍需大學(xué);2001年

3 布日額;GPV VP及NS基因克隆及其原核表達(dá)產(chǎn)物的研究和應(yīng)用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 韓旭;犬感染細(xì)小病毒高熱原因探討[D];貴州大學(xué);2015年

2 程楠;貓泛白細(xì)胞減少癥病毒反向遺傳學(xué)操作系統(tǒng)的建立[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年

3 趙虹;番鴨細(xì)小病毒和鴨甲肝病毒3型廣西株全基因序列分析及其分子生物學(xué)診斷方法的建立[D];廣西大學(xué);2015年

4 洪馬林;一株FPV-GZ01貓細(xì)小病毒的分離鑒定與遺傳進(jìn)化分析及對(duì)貓的致病性研究[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 靳小霞;猴源細(xì)小病毒的人工感染及免疫預(yù)防研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

6 梁萌;大熊貓?jiān)醇?xì)小病毒的分離鑒定與遺傳進(jìn)化分析[D];吉林大學(xué);2013年

7 楊洋;肉食動(dòng)物細(xì)小病毒重組疫苗研究[D];吉林大學(xué);2013年

8 丁毅;貓細(xì)小病毒滅活疫苗的制備及保護(hù)性研究[D];吉林大學(xué);2010年

9 李亞莎;人血樣中細(xì)小病毒的檢測(cè)與分析：腫瘤患者人群具有高感染率[D];華中師范大學(xué);2011年

10 雍海平;貓細(xì)小病毒間接ELISA方法的建立及滅活疫苗毒株篩選[D];吉林大學(xué);2008年

，

本文編號(hào)：2065606