自噬對布魯氏菌在巨噬細胞內(nèi)增殖情況的影響
本文選題:自噬 + 布魯氏菌 ; 參考:《中國預(yù)防獸醫(yī)學報》2017年12期
【摘要】:為探究自噬作用對布魯氏菌(Brucella)在巨噬細胞(Mφ)內(nèi)增殖活力的影響,本研究將體外培養(yǎng)的Mφ細胞分組,分別采用自噬激活劑雷帕霉素(Ra)或抑制劑3-MA處理細胞,并在不同處理的細胞組中接種表達綠色熒光的重組豬種布魯氏菌(rB.suis-GFP),在接種后0.5 h~24 h,一方面通過細胞中LC3-Ⅱ含量及Mφ內(nèi)B.suis數(shù)量的測定,另一方面通過激光共聚焦顯微鏡觀察LC3-Ⅱ與B.suis共定位情況。結(jié)果顯示,感染B.suis后0.5 h,Mφ即可發(fā)生自噬作用,并且Ra+Mφ+B.suis組LC3-Ⅱ含量顯著高于其它組,表明B.suis的感染能夠促進Mφ內(nèi)LC3-Ⅱ的形成,增強Mφ的自噬作用;另一方面,Ra+Mφ+B.suis組胞內(nèi)B.suis數(shù)量顯著高于3-MA+Mφ+B.suis組與Mφ+B.suis組,表明自噬作用能夠促進B.suis在Mφ內(nèi)的增殖;但隨著胞內(nèi)B.suis數(shù)量的增加,各組LC3-Ⅱ的水平卻逐漸下降,表明B.suis感染Mφ數(shù)量達飽和后,Mφ雖然啟動自噬作用殺滅了部分B.suis,但卻不能完全抑制B.suis在Mφ內(nèi)大量增殖。本研究為初步確定自噬在B.suis增殖過程中的作用提供了依據(jù)。
[Abstract]:In order to explore the effect of autophagy on the proliferation of Brucella in macrophage (M phi), the M Phi cells were grouped in vitro by using autophagy activator rapamycin (Ra) or inhibitor 3-MA to treat the cells, and the recombinant porcine Brucella expressing green fluorescence (rB.suis-) was inoculated in different treated cell groups. GFP), after 0.5 h~24 h after inoculation, on the one hand, the content of LC3- II in cells and the number of B.suis in M Phi were measured. On the other hand, the co localization of LC3- II and B.suis was observed by laser confocal microscopy. The results showed that the autophagy could occur after the infection of B.suis 0.5 h, M phi, and the content of Ra+M Phi group was significantly higher than that of the other groups. The infection of B.suis can promote the formation of LC3- II in M phi and enhance the autophagy of M phi; on the other hand, the number of B.suis in the cell of Ra+M [Phi] +B.suis is significantly higher than that of 3-MA+M [1] +B.suis group and M [[Phi] +B.suis group, indicating that the autophagy can promote the proliferation of B.suis. When the number of B.suis infection M Phi was saturated, M Phi could kill part of B.suis, but it could not completely inhibit the proliferation of B.suis in M phi. This study provides a basis for the preliminary determination of the role of autophagy in the proliferation of B.suis.
【作者單位】: 山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院山東省濱州畜禽蜂膠疫苗研究開發(fā)推廣中心;山東綠都生物科技有限公司;
【基金】:山東省自然資金項目(ZR2013CQ005) 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團隊項目(SDAIT-10-07)
【分類號】:S852.61
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,本文編號:1994503
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