本文選題：鵝β-防御素 + 重組蛋白　； 參考：《微生物學通報》2016年09期

【摘要】：【目的】研究重組鵝β-防御素12蛋白的原核表達并探究其生物學特性�！痉椒ā坎捎肏is標簽蛋白原核表達系統(tǒng),將鵝防御素12(Av BD12)基因亞克隆到表達載體p Pro EX-HTa上,構(gòu)建重組表達質(zhì)粒。將重組表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌Rosseta感受態(tài)中,用IPTG進行誘導表達,并對該重組蛋白進行純化。進一步采用菌落計數(shù)法測定其體外抗菌活性和鹽離子穩(wěn)定性�！窘Y(jié)果】經(jīng)Tricine-SDS-PAGE電泳分析,誘導表達的鵝Av BD12重組蛋白分子量約為12 k D,大部分以包涵體形式存在。該重組蛋白對大腸桿菌、雞白痢沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、四聯(lián)球菌、枯草芽孢桿菌均具有抗菌活性,高濃度鹽離子顯著抑制重組蛋白的抗菌活性。此外,該重組蛋白對雞紅細胞沒有溶血活性�！窘Y(jié)論】該重組蛋白具有廣譜抗菌活性,高濃度鹽離子顯著降低其抗菌活性,且該重組蛋白不具有溶解雞紅細胞的活性。
[Abstract]:[objective] to study the prokaryotic expression of recombinant goose 尾 -defensin 12 protein and explore its biological characteristics. [methods] 12(Av BD12 gene was subcloned into the expression vector p Pro EX-HTa by using His tag protein prokaryotic expression system. The recombinant expression plasmid was constructed. The recombinant expression plasmid was transformed into Escherichia coli (E. coli) Rosseta competent state and was induced to express by IPTG, and the recombinant protein was purified. The antibacterial activity and salt ion stability in vitro were determined by colony counting method. [results] by Tricine-SDS-PAGE electrophoresis, the molecular weight of the recombinant protein induced by Av BD12 was about 12 KD, most of which were in the form of inclusion body. The recombinant protein had antibacterial activity against Escherichia coli, Salmonella pullorum, Staphylococcus aureus, Tetracoccus tetralogus and Bacillus subtilis. In addition, the recombinant protein has no hemolytic activity on chicken red blood cells. [conclusion] the recombinant protein has broad-spectrum antibacterial activity, the high concentration of salt ions significantly reduces its antibacterial activity, and the recombinant protein does not have the activity of dissolving chicken red blood cells.
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學動物科技學院;
【基金】：教育部博士點基金項目(No.20122325110016) 哈爾濱市科技創(chuàng)新人才研究專項資金項目(No.2013RFXXJ019) 黑龍江省應用技術(shù)研究與開發(fā)計劃項目(No.PC13S02)~~
【分類號】：S852.2

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本文編號：1911672