本文選題：谷氨酰胺 + 氧化損傷��； 參考：《動物營養(yǎng)學報》2017年08期

【摘要】：本試驗旨在通過研究谷氨酰胺對過氧化氫(H_2O_2)誘導氧化應激人結腸癌HT-29細胞損傷和凋亡的影響,闡明谷氨酰胺的抗氧化效果和作用機理。HT-29細胞經不同濃度[0(對照組)、0.5、2.0、10.0 mmol/L]谷氨酰胺和0.35 mmol/L H_2O_2分別處理12、24、32 h后,測定細胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并采用熒光定量PCR方法分析谷氨酰胺對H_2O_2誘導的細胞凋亡相關基因的mRNA相對表達量,以及采用膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶雙染法對HT-29細胞染色,并用流式細胞儀檢測細胞的凋亡情況。結果表明:1)處理24 h后,0.5、2.0 mmol/L Gln組SOD活性顯著高于對照組(P0.05);處理32 h后,0.5、2.0 mmol/L Gln組SOD活性顯著高于對照組(P0.05),MDA含量顯著低于對照組(P0.05)。2)處理12 h后,各組天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)和B淋巴細胞瘤-2相關X蛋白(Bax)mRNA相對表達量無顯著差異(P0.05)。與對照組比較,0.5 mmol/L Gln組核轉錄因子κB(NF-κB)mRNA相對表達量顯著降低(P0.05),0.5與2.0 mmol/L Gln組B淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)mRNA相對表達量顯著提高(P0.05)。處理24 h后,與對照組比較,0.5、2.0和10.0 mmol/L Gln組Caspase-3、NF-κB和Bax mRNA相對表達量均顯著降低(P0.05),Bcl-2mRNA相對表達量顯著升高(P0.05)。處理32 h后,與對照組比較,2.0 mmol/L Gln組細胞表面誘導凋亡分子(FAS)、Caspase-3、NF-κB、Bax mRNA相對表達量均顯著降低(P0.05),Bcl-2mRNA相對表達量顯著升高(P0.05);10.0 mmol/L Gln組FAS、Caspase-3、NF-κB、Bax mRNA相對表達量均顯著升高(P0.05)。3)處理24 h后,與對照組比較,Gln處理使活細胞數量提高了5.32%~11.97%,壞死細胞數量降低了6.75%~12.66%。處理32 h后,與對照組比較,Gln處理使活細胞數量提高了1.39%~7.63%,壞死細胞數量降低了3.40%~4.57%。由此可見,谷氨酰胺可抑制氧化應激反應,降低H_2O_2誘導的HT-29細胞凋亡。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the effects of glutamine on oxidative stress induced HT-29 cell damage and apoptosis in human colon cancer cells induced by H _ 2O _ 2 / H _ 2O _ 2 / H _ 2O _ 2. To elucidate the antioxidation effect and mechanism of glutamine. HT-29 cells were treated with glutamine and 0.35 mmol/L H_2O_2 at different concentration [0 (control group) 0.52.0 ~ 10.0 mmol/L] for 32 h respectively. The activity of superoxide dismutase (SOD) and the content of malondialdehyde (MDA) in HT-29 cells were measured. The relative expression of glutamine on apoptosis-related genes induced by H_2O_2 was analyzed by fluorescence quantitative PCR, and HT-29 cells were stained by fluorescein isothiocyanate / pyridine iodide double staining. Apoptosis was detected by flow cytometry. The results showed that the activity of SOD was significantly higher in 0.5 mmol/L Gln group than that in control group after 24 h treatment, and significantly higher in 0.55 mmol/L Gln group than that in control group after 32 h treatment. There was no significant difference in the relative expression of aspartate proteolytic enzyme-3 (caspase-3) and B lymphocytoma-related X protein (Baxo) mRNA in each group (P 0. 05). Compared with the control group, the relative expression of NF-魏 B)mRNA in the 0.5 mmol/L Gln group was significantly lower than that in the 2. 0 mmol/L Gln group. The relative expression of NF-魏 B)mRNA in the B lymphocytoma of group 2. 0 was significantly higher than that in the group of 2. 0 mmol/L Gln. After treatment for 24 h, the relative expression of Caspase-3 NF- 魏 B and Bax mRNA in the 0. 5 mmol/L Gln group was significantly lower than that in the control group (P 0. 05) and the relative expression of Bcl-2 mRNA was significantly increased (P 0. 05). After treatment for 32 h, the relative expression of apoptosis-inducing Caspase-3NF- 魏 BnBax mRNA was significantly decreased in the 2. 0 mmol/L Gln group compared with the control group. The relative expression of Bcl-2 mRNA in the P0. 05 mmol/L Gln group was significantly higher than that in the control group. The relative expression of Caspase-3 NF- 魏 B Bax mRNA in the P0. 05 mmol/L Gln group was significantly higher than that in the P0. 05 mmol/L Gln group (P 0. 05. 3) after treatment, the relative expression of Caspase-3NF- 魏 B Bax mRNA was significantly increased at 24 h after treatment. Compared with the control group, GLN treatment increased the number of living cells by 5.32 and 11.97, and decreased the number of necrotic cells by 6.75 and 12.66. After 32 hours of treatment, compared with the control group, GLN treatment increased the number of living cells by 1.39 and 7.63, and the number of necrotic cells decreased by 3.40 and 4.57. Therefore, glutamine can inhibit oxidative stress reaction and reduce H_2O_2 induced apoptosis of HT-29 cells.
【作者單位】： 浙江省農業(yè)科學院農產品質量標準研究所;浙江省植物有害生物防控省部共建國家重點實驗室培育基地;貴州大學動物科學學院;浙江大學動物科學學院;
【基金】：國家自然科學基金(31402083) 浙江省自然科學基金重點項目(LZ15C170001)
【分類號】：S816

【參考文獻】

相關期刊論文 前5條

1 閆靜;葉琳;;谷氨酰胺在肝損傷中的應用研究進展[J];腸外與腸內營養(yǎng);2016年01期

2 趙繼榮;畢陽;劉紅霞;高雄杰;;Trizol法提取厚皮甜瓜果實RNA條件的篩選[J];甘肅農業(yè)大學學報;2009年02期

3 生偉;池一凡;孫忠東;;熱休克蛋白70對供心細胞Bcl-2、Bax蛋白表達的影響[J];中國心血管病研究雜志;2007年01期

4 韓建立,陳璽華,鮑民生;丙氨酰-谷氨酰胺對人結腸癌細胞株增殖活性的影響[J];中華胃腸外科雜志;2003年05期

5 鄭善軍,蔣寶泉,唐蓉,毛丹丹;谷氨酰胺對放射損傷大鼠腸粘膜屏障功能和抗氧化能力的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;2003年11期

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 肖英平;桂國弘;陳安國;何祥祥;李開鋒;楊華;;谷氨酰胺對過氧化氫誘導氧化應激人結腸癌HT-29細胞損傷和凋亡的影響[J];動物營養(yǎng)學報;2017年08期

2 王東;李冠;;一種適合提取新疆哈密瓜病毒總RNA的氯化鋰沉淀法[J];新疆大學學報(自然科學版);2017年01期

3 江濤;張露藝;曾英;文秀玉;龍曉靜;陳冬梅;;經腸內營養(yǎng)補充谷氨酰胺對血清蛋白的影響[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2016年15期

4 侯哲;陸秀君;張曉林;梅梅;魏俊;李昂;;天女木蘭不同組織總RNA提取方法的篩選與優(yōu)化[J];中南林業(yè)科技大學學報;2016年07期

5 徐亞維;尹銳;王俊玲;;藍莓苯丙氨酸解氨酶基因的克隆與表達載體構建[J];貴州農業(yè)科學;2015年12期

6 張卿;劉帥;邢宇;曹慶芹;秦嶺;;草莓果實總RNA提取方法的比較[J];中國農學通報;2015年31期

7 楊建榮;宋懷宇;姜春華;;谷胺酰胺顆粒對慢性重癥乙型肝炎患者肝功能和內毒素水平的影響[J];中國臨床新醫(yī)學;2015年06期

8 王杰;王全;田娜;王瑜;王愛香;張克中;崔金騰;;不同植物組織RNA提取方法的比較分析[J];北京農學院學報;2015年01期

9 陳英;吳友根;楊東梅;張軍鋒;林尤奮;胡新文;;廣藿香不同組織總RNA提取方法的篩選與優(yōu)化[J];江蘇農業(yè)科學;2014年12期

10 景俊杰;;谷氨酰胺雙肽與臨床應用[J];中國醫(yī)學創(chuàng)新;2011年30期

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 王卉;李麗;肖云瑾;任曉晴;王小紅;;谷氨酰胺對肝臟手術后缺血再灌注腸道功能的影響[J];臨床合理用藥雜志;2015年01期

2 Gábor Firneisz;;Non-alcoholic fatty liver disease and type 2 diabetes mellitus: The liver disease of our age?[J];World Journal of Gastroenterology;2014年27期

3 Courtney S Schaffert;Michael J Duryee;Carlos D Hunter;Bartlett C Hamilton 3rd;Amy L DeVeney;Mary M Huerter;Lynell W Klassen;Geoffrey M Thiele;;Alcohol metabolites and lipopolysaccharide: Roles in the development and/or progression of alcoholic liver disease[J];World Journal of Gastroenterology;2009年10期

4 楊寅桂;莊勇;婁群峰;劉強;曹清河;陳勁楓;;適于cDNA-AFLP的黃瓜幼葉總RNA快速高效提取方法[J];江西農業(yè)大學學報;2007年01期

5 莊軍平;蘇菁;陳維信;;一種從香蕉果實提取高質量RNA的方法[J];分子植物育種;2006年01期

6 姚玉新,趙玲玲,郝玉金,翟衡;改良熱硼酸法高效提取蘋果果實RNA[J];果樹學報;2005年06期

7 劉靜;李樹青;;心肌缺血再灌注損傷誘發(fā)細胞凋亡的研究進展[J];中國心血管病研究雜志;2005年12期

8 于秀梅,康振生,崔素萍,趙杰;小麥不同器官總RNA含量及提取方法的比較研究[J];西北農林科技大學學報(自然科學版);2005年10期

9 趙惠新,李冠,葛娟,李金玉;甜瓜總RNA快速提取[J];種子;2005年05期

10 劉鎮(zhèn),連俊蘭,雷健;心肌缺血再灌注炎癥損傷機制的研究進展[J];中國心血管病研究雜志;2004年11期

，

本文編號：1850491