本文選題：大腸桿菌 + 耐藥性��； 參考：《寧夏大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：近年來(lái),大腸桿菌耐藥現(xiàn)象日益嚴(yán)重,且各種耐藥機(jī)制通常會(huì)共同存在、彼此協(xié)同,導(dǎo)致其耐藥的復(fù)雜性,其復(fù)雜的耐藥性也加大了臨床治療的困難。因此研究寧夏地區(qū)牛源大腸桿菌整合子及外排泵機(jī)制對(duì)細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的影響,不僅對(duì)臨床合理用藥具有指導(dǎo)意義,而且為控制細(xì)菌耐藥性的形成和傳播提供理論依據(jù)。本研究以臨床分離鑒定的245株奶牛乳房炎大腸桿菌為試驗(yàn)菌,采用K-B法測(cè)定245株大腸桿菌對(duì)16種抗菌藥的耐藥性;采用PCR技術(shù)對(duì)菌株的Ⅰ型整合子進(jìn)行檢測(cè)。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,245株大腸桿菌對(duì)氨芐西林耐藥率最高,達(dá)到51.48%,其次對(duì)鏈霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素和氯霉素的耐藥率也較高,分別為37.96%、35.51%、36.33%、33.06%,諾氟沙星耐藥率最低,僅為7.16%。整合子檢測(cè)結(jié)果顯示,有35株大腸桿菌攜帶Ⅰ型整合子,檢出率為14.29%;35株Ⅰ型整合子陽(yáng)性菌株中32株菌擴(kuò)增出7種類(lèi)型基因盒,通過(guò)對(duì)基因盒進(jìn)行測(cè)序分析,發(fā)現(xiàn)其以介導(dǎo)甲氧芐啶和氨基糖苷類(lèi)耐藥的dfrA和aadA為主,其中,基因盒排列dfrA17-aadA5和dfrA7較為流行。以35株整合子陽(yáng)性菌株為試驗(yàn)菌,對(duì)其進(jìn)行ESBLs基因的檢測(cè)。結(jié)果顯示,35株整合子陽(yáng)性菌株中全部檢測(cè)出ESBLs基因,其中blaTEM、blaCTX-M、blaOXA三種基因的檢出率分別為88.57%(31/35)、91.43%(32/35)、14.29%(5/35),而未檢出blaSHV基因。35株菌中有24株同時(shí)攜帶blaCTX-M和blaTEM基因,1株同時(shí)攜帶blaCTX-M和blaOXA基因,4株同時(shí)攜帶blaCTx-M、blaTEM及blaOXA三種ESBLs基因。采用PCR方法對(duì)245株大腸桿菌進(jìn)行floR基因的檢測(cè)；以floR基因陽(yáng)性且耐氟苯尼考的菌株及大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC25922)為試驗(yàn)菌,運(yùn)用HPLC技術(shù)測(cè)定氟苯尼考在細(xì)菌內(nèi)的積聚量。結(jié)果floR基因檢出率為7.35%；菌內(nèi)氟苯尼考積聚量的測(cè)定結(jié)果顯示：使用CCCP前后,大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC2592)對(duì)氟苯尼考的積聚量并無(wú)太大變化,而耐藥菌株對(duì)氟苯尼考的積聚量受CCCP的影響較大。綜上所述,本研究通過(guò)分析研究寧夏地區(qū)牛源大腸桿菌耐藥性、Ⅰ型整合子及外排泵機(jī)制對(duì)細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的影響,初步揭示了大腸桿菌在寧夏地區(qū)奶牛場(chǎng)的耐藥情況和Ⅰ型整合子的流行情況以及氟苯尼考的外排泵耐藥機(jī)制,為監(jiān)控寧夏地區(qū)牛源大腸桿菌耐藥性的流行趨勢(shì)、控制耐藥性的形成和傳播以及耐藥機(jī)制的研究提供理論依據(jù)。
[Abstract]:In recent years, the drug resistance of Escherichia coli is becoming more and more serious, and all kinds of drug resistance mechanisms usually exist together, together with each other, resulting in the complexity of drug resistance, and its complex drug resistance has also increased the difficulty of clinical treatment. Therefore, the study of the influence of the integron and the efflux pump mechanism of bovine Escherichia coli in Ningxia on the bacterial resistance is not only Clinical rational use of drugs is of guiding significance, and provides a theoretical basis for controlling the formation and transmission of bacterial resistance. In this study, 245 colitis colibacilli were identified by clinical isolation as experimental bacteria, and the resistance of 245 strains of Escherichia coli to 16 antibiotics was determined by K-B; and PCR technique was used to carry out the type I integron of the strain. The drug sensitivity test showed that the resistance rate of 245 strains of Escherichia coli to ampicillin was the highest, reaching 51.48%. Secondly, the resistance rate of streptomycin, tetracycline, doxycycline and chloramphenicol was also high, 37.96%, 35.51%, 36.33%, 33.06%, and norfloxacin was the lowest, only the 7.16%. integron test results showed that 35 Escherichia coli were carried. The detection rate of type I integron was 14.29%. 7 types of gene boxes were amplified by 32 strains of type I integron positive strains. By sequencing and analysis of the gene boxes, it was found that dfrA and aadA, which mediate the resistance of trimethoprim and aminoglycoside, were mainly dfrA and aadA, and the gene box row dfrA17-aadA5 and dfrA7 were more popular. 35 strains of integron Yang were integrated. The ESBLs gene was detected by the strain of the strain. The results showed that the ESBLs gene was detected in all 35 zygote positive strains, of which the detection rates of three genes of blaTEM, blaCTX-M and blaOXA were 88.57% (31/35), 91.43% (32/35), 14.29% (5/35), but 24 strains of.35 strains were not detected at the same time carrying blaCTX-M and blaTEM. Gene, 1 strains carried blaCTX-M and blaOXA gene simultaneously, 4 strains carried blaCTx-M, blaTEM and blaOXA three ESBLs genes simultaneously. The PCR method was used to detect the floR gene of 245 strains of Escherichia coli; the floR gene positive and the florfenicol resistant strain and the Escherichia coli standard strain (ATCC25922) were tested as the test bacteria, and the florfenicol was determined by HPLC technique. The accumulation of the floR gene was 7.35%. The results of the accumulation of fluorfenicol in the bacteria showed that the accumulation of florfenicol was not very significant before and after the use of CCCP, and the accumulation of florfenicol was greatly influenced by the drug resistant strain on florfenicol. To sum up, this study passed the study. The drug resistance of Escherichia coli in Ningxia, the effect of type I integron and the efflux pump mechanism on the bacterial resistance were analyzed. The drug resistance of Escherichia coli in Ningxia dairy farm and the epidemic situation of type I integron and the resistance mechanism of florfenicol out of the efflux pump were preliminarily revealed in order to monitor the bovine coliform rod in Ningxia area. It provides a theoretical basis for studying the epidemic trend of bacterial resistance, controlling the formation and spread of drug resistance and the mechanism of drug resistance.

【學(xué)位授予單位】：寧夏大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S852.61

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本文編號(hào)：1837253