本文選題：仔豬 + 免疫應激��； 參考：《中國農業(yè)科學院》2015年碩士論文

【摘要】：肌纖維亞型的組成直接影響肌內脂肪含量、嫩度以及肉色等肉品質特性。在動物初生階段極易發(fā)生免疫應激。免疫應激導致動物血漿中TNF-α等炎性細胞因子水平急劇升高。體外研究發(fā)現,TNF-α可使C2C12細胞中Ⅰ型肌纖維m RNA表達量降低,Ⅱ型肌纖維m RNA表達量升高。由此推測,幼齡動物發(fā)生免疫應激時,可能通過TNF-α等調控肌纖維亞型的表達。為驗證上述推測,本論文開展了以下研究,為今后通過調控仔豬免疫應激,提高仔豬生產性能,改善豬肉品質提供理論基礎。1、免疫應激對仔豬骨骼肌纖維亞型轉化的影響選取16頭斷奶大白仔豬,隨機分為對照組、LPS組。LPS組隔天靜脈注射Lipopolysaccharide(LPS),初始注射劑量80μg/kg.BW,隨后逐次遞增30%,對照組注射相應劑量的生理鹽水,試驗期15 d。研究發(fā)現:注射第9天,仔豬血漿中的IL-6、TNF-α和結合珠蛋白仍顯著升高,表明仔豬處于慢性免疫應激。骨骼肌中My HC1 m RNA和蛋白表達量顯著降低(P0.05),My HC2b m RNA和My HC2蛋白表達量顯著升高(P0.05),CaN、PGC-α表達量顯著降低(P0.05),背最長肌中氧化酶活性顯著降低(P0.05),酵解型酶活性顯著升高(P0.05),表明遞增注射LPS誘導仔豬慢性免疫應激,導致骼肌肌纖維由Ⅰ型向Ⅱ型轉化。2、體內大鼠模型探究TNF-α對骨骼肌纖維亞型轉化的影響及機制選取72只4周齡斷奶SD雄性大鼠,隨機分為對照組、LPS組和單抗組(LPS+TNF-α單抗組),LPS組和單抗組分別在1、3、5、7d腹腔注射LPS,初始注射劑量1 mg/kg.BW,以后每次遞增30%,對照組注射相應劑量的生理鹽水,單抗組在注射LPS前1h腹腔注射2 mg/kg.BW的英夫利昔。后4周不做任何處理。研究發(fā)現:遞增注射LPS導致大鼠血清中TNF-α等炎性細胞因子水平升高,同時降低CaN和PGC-α的表達水平,并誘導骨骼肌Ⅰ型向Ⅱ型轉化;利用單抗降低TNF-α水平,同時也緩解了骨骼肌纖維亞型的轉化,表明肌纖維亞型的轉化可能與TNF-α升高有關。停止注射LPS后,MyHC亞型表達量無顯著差異,表明免疫應激停止后,其對骨骼肌纖維亞型的影響逐漸消除。3、體外細胞培養(yǎng)探究TNF-α對骨骼肌纖維亞型轉化的機制用10%的胎牛血清生長培養(yǎng)基培養(yǎng)C2C12細胞,接種于96孔板和6孔板中,待其融合達到80%后,用2%滅活馬血清分化培養(yǎng)基取代生長培養(yǎng)基,誘導分化3 d后,在培養(yǎng)液中加入不同濃度的TNF-α(0 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/m L、20 ng/mL),繼續(xù)培養(yǎng)3 d后,每個梯度3個重復。研究發(fā)現:TNF-α顯著提高了MyHC2b/My HC1的比值(P0.05)。表明:TNF-α誘導了肌纖維亞型從Ⅰ型向Ⅱ型的轉化。同時TNF-α顯著降低胞內Ca2+濃度(P0.05),表明免疫應激升高TNF-α,可能通過下調Ca2+/CaN/PGC-α途徑,誘導骨骼肌纖維亞型轉化。綜上所述,遞增注射LPS模擬慢性免疫應激,誘導仔豬、大鼠骨骼肌纖維由Ⅰ型向Ⅱ型轉化;這種轉化與提高血清中TNF-α水平有關。TNF-α升高可能通過下調Ca2+/CaN/PGC-α途徑調控骨骼肌亞型的表達。
[Abstract]:The composition of muscle fiber subtype directly affects meat quality characteristics such as muscle fat content, tenderness and meat color. Immune stress is easy to occur in the newborn stage of animals. The level of inflammatory cytokines such as TNF- 偽 in animal plasma was increased sharply by immune stress. It was found that TNF- 偽 could decrease the expression of type 鈪，

本文編號：1825500