本文選題：牛源犬新孢子蟲　切入點(diǎn)：NcAMA基因　出處：《中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年02期

【摘要】：PCR擴(kuò)增牛源犬新孢子蟲NcAMA1基因,克隆至pMD18-T simple載體;將鑒定正確的NcAMA1基因亞克隆至pCR259腺病毒穿梭載體,構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒pCR259-NcAMA1;依次轉(zhuǎn)化HighQ-1Transpose-AdTM294和HighQ-1TM感受態(tài)細(xì)胞,構(gòu)建NcAMA1基因重組腺病毒表達(dá)質(zhì)粒T294-NcAMA1;PacⅠ酶線性化后,脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染至QBI-HEK293細(xì)胞,包裝Ad5-NcAMA1重組腺病毒。結(jié)果表明,獲得Ad5-NcAMA1重組腺病毒滴度為5.6×109 TCID50/mL;經(jīng)PCR檢測(cè)到重組腺病毒NcAMA1基因;經(jīng)IFAT和Western blot檢測(cè)NcAMA1基因在QBIHEK293細(xì)胞中獲得表達(dá),表達(dá)蛋白相對(duì)分子質(zhì)量為68 000,具有較好的反應(yīng)原性。本試驗(yàn)成功構(gòu)建了Ad5-NcAMA1重組腺病毒,為牛源犬新孢子蟲NcAMA1基因重組腺病毒載體疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:The recombinant adenovirus was cloned into pCR259 adenovirus shuttle vector to construct recombinant adenovirus shuttle plasmid pCR259 - Nc@@

【作者單位】： 延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31160501,31360605) 吉林省重點(diǎn)科技攻關(guān)資助項(xiàng)目(20140204078NY) 吉林省教育廳重點(diǎn)資助項(xiàng)目(吉教科合字[2015]第1號(hào)) 吉林省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(20160101201JC)
【分類號(hào)】：S852.7

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