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豬丹毒桿菌和溶血性曼氏桿菌二重TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2018-03-27 15:19

  本文選題:豬丹毒桿菌 切入點(diǎn):溶血性曼氏桿菌 出處:《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年08期


【摘要】:為建立一種快速、準(zhǔn)確檢測豬丹毒桿菌和溶血性曼氏桿菌二重TaqMan熒光定量PCR方法,本研究根據(jù)豬丹毒桿菌和溶血性曼氏桿菌16S rRNA基因保守序列設(shè)計(jì)種特異性引物及探針,并優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了檢測豬丹毒桿菌和溶血性曼氏桿菌的二重TaqMan熒光定量PCR檢測方法。結(jié)果表明,所建方法特異性良好,與其他25種常見細(xì)菌均無交叉反應(yīng)。豬丹毒桿菌檢測在2.07×108~2.07×103copies/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,最低可以檢測到2.07×102copies/L的標(biāo)準(zhǔn)品陽性質(zhì)粒,批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于3%;溶血性曼氏桿菌檢測在1.07×108~1.07×103copies/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,最低可以檢測到1.07×102copies/L的標(biāo)準(zhǔn)品陽性質(zhì)粒,批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于3%。應(yīng)用建立的二重?zé)晒舛糠椒ê推胀晒舛糠椒▽?7份臨床樣品進(jìn)行檢測,符合率為100%。本研究結(jié)果表明,所建立的方法可用于豬丹毒桿菌和溶血性曼氏桿菌感染的高通量快速診斷以及豬丹毒桿菌和溶血性曼氏桿菌的快速鑒定及定量分析。
[Abstract]:In order to establish a rapid and accurate method for the detection of dual TaqMan quantitative PCR of erysipelas porcine and M. haemolyticus, specific primers and probes were designed according to the conserved sequence of 16s rRNA gene of erysipelas and M.haemolyticus. A double TaqMan fluorescence quantitative PCR method for the detection of erysipelas and M.haemolyticus was established under optimized reaction conditions. The results showed that the method was of good specificity. There was no cross reaction with other 25 common bacteria. The detection of erysipelas had a good linear relationship in the range of 2.07 脳 10 ~ (8) ~ 2.07 脳 103copies/L, and a positive plasmid of 2.07 脳 102copies/L could be detected at least. The coefficient of variation within and between batches was less than 3, and the detection of M.haemolyticus had a good linear relationship in the range of 1.07 脳 10 ~ (8) ~ 1.07 脳 103copies/L, and the lowest positive plasmid of 1.07 脳 102copies/L could be detected in the range of 1.07 脳 10 ~ (8) ~ 1.07 脳 103copies/L. The coefficient of variation within and between batches was less than 3. The coincidence rate of 47 clinical samples was 100 by using the established double fluorescence quantitative method and the general fluorescence quantitative method. The established method can be used for high throughput rapid diagnosis of erysipelas and M.haemolyticus infection, and for rapid identification and quantitative analysis of erysipelas and M.haemolyticus.
【作者單位】: 云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院;云南省陸良縣動物疾病預(yù)防控制中心;
【基金】:云南省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目(云財(cái)教[2013]160號) 云南省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)(云財(cái)農(nóng)[2009]171號)
【分類號】:S852.61

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1 付啟勇;張猛剛;范翔九;李子忠;劉芝平;;魚源雞源豬丹毒桿菌對抗菌藥物的敏感性試驗(yàn)[J];家畜傳染病;1986年05期

2 郭良興;陳克研;趙魁;高巍;李志萍;趙傳博;王麗;高豐;;豬丹毒桿菌的分離鑒定及耐藥性試驗(yàn)[J];中國畜牧獸醫(yī);2011年04期

3 韓儀;榮翠琴;周鴻生;;豬丹毒桿菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)有效抗原的分離純化及其免疫學(xué)性質(zhì)[J];南京大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1981年01期

4 徐漢祥;;金黃倉鼠對豬丹毒桿菌的易感性[J];上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);1988年01期

5 錢心元;房艷麗;;豬丹毒桿菌毒力和敏感性檢查試驗(yàn)用家鴿素質(zhì)的影響[J];上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);1991年01期

6 ;中草藥對豬丹毒桿菌的抑菌試驗(yàn)初報(bào)[J];科技簡報(bào);1972年19期

7 徐漢祥;;仔鼠獲得母源豬丹毒桿菌抗體后免疫力持續(xù)時(shí)間的測定[J];上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);1990年02期

8 馮洪錢;64種中草藥對豬丹毒桿菌的抑菌試驗(yàn)[J];微生物學(xué)通報(bào);1976年01期

9 萬培偉;熊莉娟;儲玉雙;胡善輝;黃小紅;蔣新華;鄧舜洲;張文波;;豬丹毒桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年06期

10 秦學(xué)敏 ,費(fèi)偉蓮 ,胡興富 ,王良娟 ,張春琳;葡萄球菌A蛋白(SPA)在豬丹毒桿菌鑒定上的應(yīng)用試驗(yàn)[J];石河子農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào);1984年01期

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1 邱美珍;杜麗飛;楊愛梅;王慧;楊俊;周望平;;豬丹毒桿菌臨床分離鑒定與藥敏實(shí)驗(yàn)[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物傳染病學(xué)分會第十二次人獸共患病學(xué)術(shù)研討會暨第六屆第十四次教學(xué)專業(yè)委員會論文集[C];2012年

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1 科農(nóng);雨季豬欄消毒法[N];河南科技報(bào);2000年

2 潔蕓;秋季豬常見病的防治(一)[N];湖北科技報(bào);2001年

3 ;鴨丹毒的防治法[N];吉林農(nóng)村報(bào);2008年

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1 陸萍;豬丹毒桿菌安徽分離株的生物學(xué)特性及SpaA蛋白免疫原性研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 魏文濤;豬丹毒桿菌安徽株生物學(xué)特性及Real-Time PCR檢測方法的建立[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 鄒W,

本文編號:1672079


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