LPS誘導(dǎo)牦牛成纖維細(xì)胞TLR4及其信號(hào)通路基因表達(dá)變化分析
本文選題:成纖維細(xì)胞 切入點(diǎn):牦牛 出處:《中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年09期 論文類型:期刊論文
【摘要】:采用PCR方法從牦牛成纖維細(xì)胞中擴(kuò)增TLR4基因,并用5mg/L質(zhì)量濃度的LPS誘導(dǎo)牦牛成纖維細(xì)胞,分別在0,12,24,36h用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)TLR4及其信號(hào)通路基因(IL-1β、IL-8)mRNA水平的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果顯示,克隆得到TLR4基因序列長(zhǎng)2 067bp(GenBank號(hào):KU743904),與GenBank中野牦牛TLR4的相似性達(dá)99%。5mg/L質(zhì)量濃度的LPS誘導(dǎo)處理后的各基因與0h相比,在12和24h均有上調(diào),在36h均下調(diào)。誘導(dǎo)后24h,TLR4、IL-1β和IL-8基因的表達(dá)量均達(dá)到最大值,且都顯著高于0和36h(P0.05)。由此得出TLR4、IL-1β和IL-8均可在牦牛皮膚成纖維細(xì)胞中表達(dá),并參與了對(duì)LPS的應(yīng)答反應(yīng)。
[Abstract]:The TLR4 gene was amplified from yak fibroblasts by PCR method, and the yak fibroblasts were induced by 5 mg / L LPS. The relative expression of TLR4 and its signal pathway gene, IL-1 尾 -IL-8 mRNA was detected by real-time fluorescence quantitative PCR at 0 ~ 1212 ~ 24 ~ 36 h, respectively. The length of TLR4 gene was 2 067 BP GenBank: KU743904, and the similarity with wild yak TLR4 in GenBank was 99.5mg / L LPS. Compared with 0h, the genes were up-regulated at 12 and 24 hours. The expression levels of IL-1 尾 and IL-8 gene of TLR4 were significantly higher than those of 0 and 36 h after induction, and the results showed that TLR4, IL-1 尾 and IL-8 could be expressed in yak skin fibroblasts, and participated in the response to LPS, and the expression of TLR4TLR4 尾 and IL-8 was significantly higher than that of P0.05 at 0 and 36 h after induction, the results showed that TLR4 and IL-8 could be expressed in yak skin fibroblasts and participate in the response to LPS.
【作者單位】: 西南民族大學(xué)青藏高原研究院;西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】:中央高校青年教師基金資助項(xiàng)目(2015NZYQN60) 四川省教育廳重點(diǎn)資助項(xiàng)目(16ZA0014)
【分類號(hào)】:S823.85
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1637515
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