本文選題：山羊　切入點：人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶催化亞單位　出處：《中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立永生化山羊子宮內(nèi)膜上皮細胞系并研究其生物學(xué)特性,將人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶催化亞單位(Human telomerase reverse transcrip tase,hTERT)導(dǎo)入原代培養(yǎng)的山羊子宮內(nèi)膜上皮細胞(Endometrium epithelial cells,EECs),經(jīng)G418篩選培養(yǎng),以獲得一株永生化山羊子宮內(nèi)膜上皮細胞(hTERT-EECs);利用流式細胞儀檢測其生長周期、凋亡情況及倍體情況;利用MTT法檢測其血清依賴性;軟瓊脂克隆形成試驗檢測其在半固體培養(yǎng)基中的克隆形成能力;裸鼠致瘤實驗檢測其成瘤性。結(jié)果顯示:hTERT-EECs處于S期的細胞(43.2%±2.3%)大于2代EECs(38.7%±1.2%),差異顯著(P0.05);hTERT-EECs的凋亡率(1.1%±0.2%)明顯低于2代EECs(3.6%±0.5%)(P0.05);倍體分析結(jié)果表明hTERT-EECs為二倍體細胞;血清依賴性檢測證明hTERT-EECs仍有血清依賴性;軟瓊脂中無克隆形成能力;對于裸鼠無致瘤性。證明hTERT-EECs具有更強的生長活性,基本屬于正常細胞,不具有潛在致瘤性。
[Abstract]:In order to establish an immortalized goat endometrial epithelial cell line and study its biological characteristics, human telomerase reverse transcrip tasehTERT was introduced into the primary cultured goat endometrial epithelial cell line Endometrium epithelial cells EECs, and cultured by G418. In order to obtain an immortalized goat endometrial epithelial cell line hTERT-EECs, the growth cycle, apoptosis and ploidy were detected by flow cytometry, and serum dependence was detected by MTT assay. The clone forming ability of soft Agar was tested in semisolid medium. The results of tumorigenicity test in nude mice showed that the apoptosis rate of hTERT-EECs in S phase (43.2% 鹵2.3%) was greater than that of second generation EECs (38.7% 鹵1.2%), and the apoptosis rate of hTERT-EECs was significantly lower than that of second generation EECs (3.6% 鹵0.5%). Serum dependence test showed that hTERT-EECs still had serum-dependent, no clone forming ability in soft Agar, and no tumorigenicity in nude mice. It was proved that hTERT-EECs had stronger growth activity and belonged to normal cells, and had no potential tumorigenicity.
【作者單位】： 西藏農(nóng)牧學(xué)院動物科學(xué)學(xué)院;
【基金】：西藏自治區(qū)自然科學(xué)基金(2015212-14-34) 2015年西藏自治區(qū)高校臨床獸醫(yī)學(xué)重點實驗室建設(shè)資助項目
【分類號】：S827

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本文編號：1631983