豬鏈球菌的分離與鑒定
發(fā)布時(shí)間:2015-03-03 17:33
莊曉薇
(山東省臨朐縣畜牧局,山東 臨朐 262600)
摘要:對16份豬場病豬病料進(jìn)行病原菌分離、血清學(xué)鑒定、致病力試驗(yàn)、保護(hù)力試驗(yàn)、細(xì)菌回收試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn),結(jié)果表明,該病原菌為II 型豬鏈球菌,引起關(guān)節(jié)炎的豬鏈球菌較引起敗血癥的豬鏈球菌致病力弱;該菌對頭孢菌素、青霉素高度敏感。
關(guān)鍵詞:豬鏈球菌;分離;鑒定
中圖分類號:S852.61+1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1007-273X(2013)08-0013-03
目前發(fā)現(xiàn)的豬鏈球菌莢膜型已超過 30 種。該病一年四季均可發(fā)生,但以 4~10 月份發(fā)生較多。常為地方性流行,多呈敗血性,短期波及全群,如不進(jìn)行防治,則發(fā)病率、病死率很高,慢性常為地方性散發(fā)性傳染[2]。
1 豬場發(fā)病情況
2012 年 4 月,山東省臨朐縣某生豬繁育場仔豬流行關(guān)節(jié)炎及敗血癥,發(fā)病豬多為 2~6 周齡仔豬。無菌采取病豬的關(guān)節(jié)液、肝、脾、肺及腸系膜淋巴結(jié),經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分離鑒定,證實(shí)為II 型豬鏈球菌。
2 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 病料 無菌采取該生豬繁育場患關(guān)節(jié)炎病豬的關(guān)節(jié)液 8 份,分別編號為 1-8 號;無菌采取患敗血癥豬的肝、肺、脾及腸系膜淋巴結(jié) 8 份,分別編號為 9~16 號。
2.1.2 試劑 試驗(yàn)所用的各種糖均購自上;瘜W(xué)試劑二廠,批號為 2010~2012 年不等。
2.1.3 培養(yǎng)基 綿羊鮮血平板、匹克氏增菌液、10 ml/L豬血清肉湯及各種糖培養(yǎng)基按常規(guī)方法制備。
2.1.4 試驗(yàn)抗原 豬鏈球菌診斷血清與平板凝集抗原均購自中國獸藥鑒察所,批號為 990725。
2.1.5 藥敏紙片 購自廣東省某軍區(qū)后勤部,批號 20000312。
2.1.6 試驗(yàn)動(dòng)物 健康小白鼠 (30~35 g) 50 只,購自青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院。
2.2 方法
2.2.1 病原分離 將所采病料分別涂片,革蘭氏染色鏡檢,然后分別接種于鮮血瓊脂平板。37 ℃ 需氧培養(yǎng) 24 h 后,挑取可疑菌落接種于匹克氏增菌液,37 ℃ 培養(yǎng) 24 h 后,革蘭氏染色,顯微鏡檢查,再接種于血清肉湯,純化后放置 4 ℃,冷藏備用[3]。
2.2.2 分離菌株的鑒定
(1)生化試驗(yàn)。隨機(jī)抽取上述分離菌血清肉湯培養(yǎng)物 3#、8#、13#、15#,分別接種于蔗糖、山梨醇、棉子糖、葡萄糖、水楊苷、馬尿酸鈉培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng)24 h 后,觀察其對糖的利用情況[4]。
(2)血清學(xué)鑒定。將 3#、8#、13#、15# 菌經(jīng)血清肉湯培養(yǎng) 8 h,通過 3 000 r/min 離心 10 min,PBS 洗滌 2 次,用pH 7.2 的 0.01mol/L PBS制成 1:10~1:20倍稀釋的細(xì)菌懸液。取 1 滴上述細(xì)菌懸液與適當(dāng)?shù)目寡逶跐崈舨F匣靹颍⒓从^察凝集現(xiàn)象。同感;潔霉素和卡那霉素中度敏感;而對土霉素、鏈霉素、慶大霉素具有耐藥性。
4 討論
過去屢有敗血型豬鏈球菌的報(bào)道,而關(guān)于集約化養(yǎng)豬場關(guān)節(jié)炎型鏈球菌病的報(bào)道較少。本次試驗(yàn)從患關(guān)節(jié)炎豬的關(guān)節(jié)液中成功分離出了豬鏈球菌。另外,該種豬場約有60% 的仔豬流行關(guān)節(jié)炎,嚴(yán)重者可發(fā)生敗血癥而死亡,給種豬場造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。所以,研究該病可為生產(chǎn)中防制該病提供理論依據(jù)。
病豬的鼻液、尿液、肌肉、內(nèi)臟和關(guān)節(jié)內(nèi)均帶有病原體,建議首先應(yīng)加強(qiáng)對健康豬的免疫。另一方面,在發(fā)病后對病豬和健康豬進(jìn)行隔離,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室藥敏試驗(yàn)結(jié)果配合藥物治療,,建議用頭孢菌素、青霉素、潔霉素等藥物治療。該種豬繁育場采納我們的建議,首先對所有的未發(fā)病仔豬用滅活疫苗免疫接種,對已發(fā)病的豬用青霉素等藥物配合治療,另外注意衛(wèi)生管理。該病得到有效的控制。
5 結(jié)論
引起豬關(guān)節(jié)炎的豬鏈球菌的致病力較小,而引起敗血癥的豬鏈球菌的致病力較強(qiáng)。但通過生化試驗(yàn)和血清學(xué)鑒定,它們又是同種細(xì)菌且血清型也相同。同種血清型的豬鏈球菌的致病力之間的差異還有待于進(jìn)一步研究。
參考文獻(xiàn):
[1] 楊本升,劉玉斌,茍仕金,等. 動(dòng)物微生物學(xué)[M]. 長春:吉林科學(xué)技術(shù)出版社,1995.
[2] 黃毓茂,黃引賢.2型豬鏈球菌的血清學(xué)鑒定[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),1995,15(1):63-65
[3] 李健強(qiáng),李大金.獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)習(xí)指導(dǎo)[M]. 西安:陜西科學(xué)技術(shù)出刊社,1999.
[4] 張彥明,賈靖國,劉安典.動(dòng)物性食品衛(wèi)生檢驗(yàn)技術(shù)[M]. 西安.西北大學(xué)出版社,1996.
[5] 蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1998.
[6] 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué).獸醫(yī)微生物學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1982.
[7] 劉榮標(biāo).獸醫(yī)微生物學(xué)(上)[M]. 臺北:藝軒圖書出版社,1984.
[8] 鄭明球.家畜傳染病學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1999.
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