發(fā)布時(shí)間：2018-02-26 12:29

  本文關(guān)鍵詞： SD大鼠 醋酸鎘 α-硫辛酸 氧化損傷 縫隙連接通訊　出處：《揚(yáng)州大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：為探討鎘和a-硫辛酸((α-LA)對(duì)大鼠肝腎功能的影響以及此過程中細(xì)胞縫隙通訊功能(GJIC)的變化。本研究采用體內(nèi)建模的方法,100 g雌性SD大鼠30只預(yù)飼1周后,隨機(jī)分為3組,每組10只,分別為對(duì)照組(Control)、鎘組(Cd)、鎘與a-硫辛酸共同處理組(Cd+a-LA)。對(duì)照組實(shí)驗(yàn)大鼠自由飲用超純水(DDW),鎘組大鼠50 mg/L的醋酸鎘自由飲水,鎘與α-硫辛酸共同處理組在醋酸鎘自由飲水的同時(shí)進(jìn)行每公斤體重50mg (50mg/kg.bw) a-硫辛酸灌胃。①試驗(yàn)12周內(nèi),每天定時(shí)測(cè)定各組大鼠的采食量和體重,在試驗(yàn)第4周、8周對(duì)各組大鼠進(jìn)行眼眶靜脈叢采血,進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè),并測(cè)定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血清堿性磷酸酶(ALP)活性及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)的含量。②試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行血常規(guī)以及血清中生化相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)的同時(shí),測(cè)定各組大鼠血清、肝臟、腎臟中超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)的活性以及丙二醛(MDA)、鎘的含量。③采用透射電鏡以及光學(xué)顯微鏡觀察各組大鼠的肝臟、腎皮質(zhì)的病理、超微結(jié)構(gòu)變化。④采用切開熒光染料標(biāo)記傳輸示蹤法(IL/DT)對(duì)各組肝臟細(xì)胞間縫隙連接通訊功能進(jìn)行檢測(cè)。利用Westemblot檢測(cè)各組大鼠肝臟、腎臟中Cx43、p-Cx43、Cx32蛋白表達(dá)變化。⑤采用熒光定量PCR法檢測(cè)試驗(yàn)結(jié)束后各組大鼠肝臟、腎臟中Cx32、Cx26、Cx43mRNA表達(dá)量的變化。結(jié)果表明：①試驗(yàn)4周后,各組大鼠血液紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量以及肝腎功能相關(guān)指標(biāo)(ALB、AST、ALT、BUN、UA、TP、ALP)變化不明顯。試驗(yàn)8周、12周鎘組大鼠血清ALB、AST、ALT、BUN、UA含量顯著或極顯著高于對(duì)照組(p0.05或p0.01),而TP、ALP含量顯著或極顯著低于對(duì)照組(p0.05或p0.01),紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量顯著或極顯著低于對(duì)照組(p0.05或p0.01),而鎘與α-硫辛酸共同處理組在不同時(shí)間與對(duì)照組相比均差異不明顯(p0.05)。②試驗(yàn)12周后,與對(duì)照組相比,鎘組大鼠血清、肝臟、腎臟中SOD、CAT、GSH-Px活性顯著或極顯著的降低(p0.05或p0.01),MDA含量呈顯著或極顯著升高(p0.05或p0.01)；而鎘與a-硫辛酸共同處理組與對(duì)照組相比差異顯著或不顯著(p0.05或p0.05)。③鎘組肝腎病理變化表現(xiàn)為肝臟中央靜脈周圍脂肪變性、匯管區(qū)膽管上皮增生,腎皮質(zhì)腎小球萎縮。鎘與α-硫辛酸共同處理組肝細(xì)胞輕度的脂肪變性,腎小球上皮細(xì)胞顆粒變性。電鏡結(jié)果顯示：鎘組大鼠腎皮質(zhì)、肝臟細(xì)胞器損傷明顯,表現(xiàn)為細(xì)胞核濃縮,核內(nèi)染色質(zhì)分布不均勻,線粒體脊完全消失、模糊。而鎘與α-硫辛酸共同處理組大鼠肝腎超微結(jié)構(gòu)變化相對(duì)較輕。④IL/DT結(jié)果顯示,鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組肝細(xì)胞兩側(cè)熒光黃(LY)擴(kuò)散距離極顯著低于對(duì)照組(p0.01),而鎘與α-硫辛酸共同處理組兩側(cè)LY擴(kuò)散距離極顯著高于鎘組(p0.01)；與對(duì)照組相比,鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組肝腎中連接蛋白43(Cx43)、磷酸化連接蛋白43(p-Cx43)、連接蛋白32(Cx32)蛋白表達(dá)量呈顯著或極顯著的降低(p0.05或p0.01),而鎘與α-硫辛酸共同處理組的連接蛋白表達(dá)水平顯著或極顯著的高于鎘組(p0.05或p0.01)。⑤鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組大鼠肝腎中Cx43、Cx32、Cx26 mRNA轉(zhuǎn)錄基因表達(dá)與對(duì)照組相比均顯著或極顯著的降低(p0.05或p0.01),鎘與α-硫辛酸共同處理組與鎘組相比呈顯著或極顯著升高(p0.05或p0.01)。結(jié)論：①a-硫辛酸能夠保護(hù)鎘對(duì)大鼠肝腎功能以及血液常規(guī)指標(biāo)的毒性變化,試驗(yàn)期越長(zhǎng)α-硫辛酸保護(hù)作用越明顯；②鎘可以引起大鼠血清以及肝腎中抗氧化物酶活性的降低以及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的升高,α-硫辛酸能提高機(jī)體的抗氧化功能而保護(hù)鎘的毒性；③鎘引起大鼠多種組織發(fā)生明顯的病理學(xué)變化,肝臟和腎臟較嚴(yán)重,尤其是細(xì)胞核、線粒體損傷嚴(yán)重,α-硫辛酸能緩解這些損傷；④鎘能降低大鼠肝腎細(xì)胞縫隙連接相關(guān)蛋白表達(dá)水平,對(duì)大鼠肝腎細(xì)胞中細(xì)胞縫隙通訊功能(GJIC)產(chǎn)生了抑制作用,α-硫辛酸能使肝腎細(xì)胞間連接蛋白發(fā)生變化,上調(diào)GJIC而起到保護(hù)作用。
[Abstract]:In order to study the effects of cadmium and alpha - lipoic acid ( 偽 - LA ) on the liver and kidney function of rats and the changes of cellular gap communication function ( GJIC ) in this process . The changes of serum ALB , AST , ALT , BUN and UA in cadmium and 偽 - lipoic acid group were significantly lower than those in control group ( P 0.05 or 0.01 ) . Cadmium can induce the decrease of antioxidant enzyme activity in rat serum and liver and kidney and the increase of lipid peroxidation products .

【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S852.3

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本文編號(hào)：1538018