豬繁殖與呼吸綜合征病毒NSP2抗原表位區(qū)的原核表達及免疫原性分析
發(fā)布時間:2018-02-20 06:33
本文關(guān)鍵詞: 豬繁殖與呼吸綜合征 NSP 免疫原性 出處:《中國畜牧獸醫(yī)》2017年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:試驗旨在表達純化豬繁殖與呼吸綜合征病毒NSP2重組蛋白。利用PCR技術(shù)擴增獲得大小為750bp的NSP2 226-475位氨基酸編碼序列,然后將該序列亞克隆到pET-28a(+)表達載體上,通過pET-28a(+)表達載體在大腸桿菌Rosetta-gami 2(DE3)pLys中得以表達,獲得大小為29ku的重組蛋白,對重組蛋白誘導時間進行優(yōu)化,SDS-PAGE顯示重組蛋白在37℃經(jīng)1mmol/L IPTG誘導8h時表達量最大,免疫印跡結(jié)果證實表達的蛋白能被PRRSV陽性血清識別,具有良好的免疫原性。本研究成功表達純化了NSP2重組蛋白,為目標蛋白作為包被抗原建立檢測PRRSV血清抗體的ELISA方法奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The aim of this study was to express and purify the recombinant NSP2 protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (RRRSV). A 750bp NSP2 226-475 amino acid encoding sequence was amplified by PCR technique and subcloned into pET-28a() expression vector. The recombinant protein of 29ku was obtained by expressing pET-28a () expression vector in E. coli Rosetta-gami 2DE3DE3pLys. The optimal induction time of the recombinant protein was optimized by SDS-PAGE. The expression of the recombinant protein was the highest at 37 鈩,
本文編號:1518995
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