豬細(xì)環(huán)病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)技術(shù)的建立及應(yīng)用
本文關(guān)鍵詞: 豬TTSuV 實(shí)時(shí)熒光PCR 檢測(cè) 出處:《中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為了實(shí)現(xiàn)豬細(xì)環(huán)病毒(TTSuV)快速檢測(cè),給TTSuV的調(diào)查、監(jiān)測(cè)和防控提供可行性、操作性強(qiáng)的技術(shù)支持。本試驗(yàn)根據(jù)TTSuV的序列特點(diǎn)設(shè)計(jì)特異性引物、探針,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)檢測(cè)TTSuV1a型和TTSuV1a1b型。以豬細(xì)小病毒、豬圓環(huán)病毒Ⅱ型和豬偽狂犬病毒進(jìn)行特異性試驗(yàn),無交叉反應(yīng)。該檢測(cè)方法具有較好的特異性和重復(fù)性,TTSuV1a靈敏度可達(dá)9.2拷貝/μL,TTSuV1b靈敏度可達(dá)5.6×101拷貝/μL;批內(nèi)變異系數(shù)均小于1%,批間變異系數(shù)均小于3%。將該方法與PCR法、PCR-DHPLC進(jìn)行比較,結(jié)果證實(shí)該方法具有較好的準(zhǔn)確性。對(duì)92份血清樣本進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)有58份TTSuV1a陽性、62份TTSuV1b陽性、51份TTSuV1a和TTSuV1b共感染陽性。本研究建立的TTSuV實(shí)時(shí)熒光PCR法具有特異、敏感、快速、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),可用于TTSuV感染的分子流行病學(xué)調(diào)查。
[Abstract]:In order to realize the pig teno virus (TTSuV) TTSuV for rapid detection, investigation, monitoring and prevention and control provide the feasibility, operability of technical support. The test according to the characteristics of sequence specific primers were designed, TTSuV probe technology, real-time fluorescent PCR detection of TTSuV1 type A and type TTSuV1a1b. The porcine parvovirus, porcine circovirus type 2 and porcine pseudorabies virus specific test, no cross reaction. The detection method has good specificity and reproducibility, sensitivity of 9.2 TTSuV1a copies / L, the sensitivity of TTSuV1b was 5.6 * 101 copies / L; the intraassay coefficient of variation were less than 1% and the inter batch variation coefficients were less than 3%. the method with the PCR method, PCR-DHPLC were compared. The result proved that this method has good accuracy. For the detection of 92 serum samples, 58 were found TTSuV1a positive, 62 were TTSuV1b positive, 51 samples TTSuV1a and TTSuV1b were positive. This research The TTSuV real-time fluorescence PCR method has the advantages of specific, sensitive, fast and reproducible, and can be used for molecular epidemiological investigation of TTSuV infection.
【作者單位】: 江西出入境檢驗(yàn)檢疫局;深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局;南昌大學(xué);
【基金】:江西省科技計(jì)劃資助項(xiàng)目(20151BBF60048)
【分類號(hào)】:S852.651
【正文快照】: 細(xì)環(huán)病毒(Torque teno virus,TTV)是1997年由日本學(xué)者NISHIZAWA等[1]首先在人血清中發(fā)現(xiàn),進(jìn)一步的流行病學(xué)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)人群中的TTV核酸陽性率在10%以上[2],隨后在豬、牛、羊、貓、犬、家禽等多種動(dòng)物體內(nèi)也相繼發(fā)現(xiàn)有該病毒的感染[3-4]。2011年國(guó)際病毒分類委員會(huì)(the intern
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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9 王,
本文編號(hào):1443964
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