鴨瘟病毒強(qiáng)弱毒株P(guān)CR檢測(cè)方法的建立
本文關(guān)鍵詞: 鴨瘟病毒 強(qiáng)毒 弱毒 聚合酶鏈反應(yīng) 出處:《動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2017年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:根據(jù)基因庫(kù)中鴨瘟病毒強(qiáng)毒株和弱毒株UL2基因保守區(qū)設(shè)計(jì)特異性引物,優(yōu)化PCR反應(yīng)的引物濃度和退火溫度等,初步建立了可同時(shí)鑒別鴨瘟病毒強(qiáng)毒株和弱毒株的PCR檢測(cè)方法,并對(duì)建立的方法進(jìn)行了敏感性、特異性驗(yàn)證和臨床樣品檢測(cè)。該P(yáng)CR檢測(cè)方法最低能檢出1pg的鴨瘟病毒強(qiáng)毒和弱毒DNA模板。對(duì)鴨瘟病毒強(qiáng)毒和弱毒模板的檢測(cè),得到了與試驗(yàn)設(shè)計(jì)相符的827bp(強(qiáng)毒)和299bp(弱毒)的擴(kuò)增條帶,而對(duì)鴨副黏病毒、鴨坦布蘇病毒、鴨圓環(huán)病毒、番鴨細(xì)小病毒、鴨Ⅰ型肝炎病毒、禽流感病毒和小鵝瘟病毒等病原體的檢測(cè)均為陰性。說(shuō)明建立了一種敏感性高、特異性好的鑒別鴨瘟病毒強(qiáng)毒和弱毒的PCR檢測(cè)方法。
[Abstract]:Specific primers were designed according to the conserved region of UL2 gene of highly and attenuated strains of duck plague virus in the gene bank to optimize the concentration of primers and annealing temperature of PCR reaction. A PCR method for the identification of both virulent and attenuated strains of duck plague virus was established, and the sensitivity of the established method was evaluated. The PCR method can detect 1 PG of highly toxic and attenuated DNA templates of duck plague virus, and detect the highly virulent and attenuated templates of duck plague virus. The amplified bands of 827bp (strong virus) and 299bp( attenuated virus) were obtained in accordance with the experimental design. The results showed that the amplified bands were suitable for duck paramyxovirus, duck tamosu virus, duck circovirus and muscovy duck parvovirus (Muscovy duck parvovirus). The detection of duck hepatitis I virus, avian influenza virus and goose plague virus were all negative, which indicated that a highly sensitive and specific PCR method for the identification of duck plague virus was established.
【作者單位】: 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廣西玉林市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】:廣西科技項(xiàng)目(桂科攻10100014-5) 國(guó)家”萬(wàn)人計(jì)劃”領(lǐng)軍人才專項(xiàng)(2016-37) 廣西特聘專家專項(xiàng)(2011B020)
【分類號(hào)】:S852.65
【正文快照】: 鴨瘟是由鴨瘟病毒(Duck plague virus,DPV)引起鴨的一種急性敗血性傳染病,發(fā)病率和病死率都甚高,是危害養(yǎng)鴨業(yè)最為嚴(yán)重的傳染病之一[1]。近年來(lái),隨著商品肉鴨集約化飼養(yǎng)范圍的不斷擴(kuò)大,該病在商品鴨群中的發(fā)病呈明顯上升趨勢(shì),未免疫鴨群的病死率接近100%,而且在同一地區(qū)或同一
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,本文編號(hào):1441898
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