四川甘孜州藏雞沙門氏菌的分離鑒定、耐藥基因及可移動(dòng)遺傳元件的檢測(cè)
本文關(guān)鍵詞:四川甘孜州藏雞沙門氏菌的分離鑒定、耐藥基因及可移動(dòng)遺傳元件的檢測(cè) 出處:《四川農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:藏雞主要分布在青藏高原海拔2200~4100 m的半農(nóng)半牧區(qū),是我國(guó)高海拔地區(qū)養(yǎng)雞業(yè)的重要品種資源。藏雞沙門氏菌病時(shí)有發(fā)生,耐藥性日益突出,給藏雞養(yǎng)殖業(yè)帶來了極大的威脅。試驗(yàn)采集四川甘孜州4個(gè)藏雞養(yǎng)殖場(chǎng)送檢的28只疑似患沙門氏菌病藏雞的心、肝、脾、肺、腎、卵巢(或睪丸)和腸內(nèi)容物,總計(jì)196份樣本,經(jīng)細(xì)菌分離純化、生化試驗(yàn)、PCR鑒定和血清型鑒定,共獲得42株藏雞沙門氏菌,其樣本檢出率為21.43%(42/196)。42株沙門氏菌共鑒定出6種血清型,其中鼠傷寒沙門氏菌(14株)、雞傷寒沙門氏菌(10株)、雞白痢沙門氏菌(8株)和腸炎沙門氏菌(6株)為主要的血清型。采用CLSI(2013)推薦的瓊脂紙片擴(kuò)散法(K-B)對(duì)42株藏雞沙門氏菌進(jìn)行21種抗菌藥物的敏感性試驗(yàn)。結(jié)果表明,藏雞沙門氏菌對(duì)21種抗菌藥物均表現(xiàn)不同程度耐藥。其中,對(duì)阿莫西林(90.48%)、羧芐西林(90.48%)的耐藥率最高,其次為氨芐西林(88.10%)、利福平(88.10%)、復(fù)方新諾明(76.19%)、四環(huán)素(69.05%)、多西環(huán)素(59.52%)、氟苯尼考(54.76%)、頭孢唑啉(47.62%)、卡那霉素(47.62%)和鏈霉素(42.86%),對(duì)慶大霉素(7.14%)、丁胺卡那(2.38%)的耐藥率最低。41株分離菌對(duì)3類以上的抗菌藥物耐藥,多重耐藥率為97.62%(41/42)。應(yīng)用PCR技術(shù)對(duì)42株藏雞沙門氏菌進(jìn)行耐藥基因檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),分離株共檢出26種耐藥基因,其中β-內(nèi)酰胺類耐藥基因blaTEM、blaCTX-M、blaSHV、 blaOXA、blaPSE和blaCMY-2,以blaTEM檢出率最高(90.48%);氨基糖苷類耐藥基因addA1、addA2、addB、AacC2、aac(3)-Ⅲ和Aph(3')-Ⅱa,以addA2檢出率最高(85.71%):四環(huán)素類耐藥基因tetA、tetB、tetC,以tetA檢出率最高(83.33%):氯霉素類耐藥基因catA1、floR、CmlA,以CmlA檢出率最高(57.14%);磺胺類耐藥基因sull、su12,以su12檢出率最高(83.33%):喹諾酮類耐藥基因qnrA、qnrB、 qnrS、aac(6')-Ib-cr、oqxA、oqxB,以aac(6')-Ib-cr檢出率最高(59.52%)。應(yīng)用PCR技術(shù)對(duì)41株藏雞多重耐藥沙門氏菌進(jìn)行可移動(dòng)遺傳元件檢測(cè)。結(jié)果共檢出traA、trbC、merA、tnpA/Tn3、tnpU、tnp513、tn1721、IS26和intⅠ1 9種可移動(dòng)遺傳元件,其中traA、trbC為國(guó)內(nèi)首次從沙門氏菌中檢出。每株菌檢出3-8種可移動(dòng)遺傳元件。通過質(zhì)粒接合試驗(yàn)驗(yàn)證了多重耐藥沙門氏菌中的耐藥基因和可移動(dòng)遺傳元件具有可移動(dòng)性。隨機(jī)將14株檢測(cè)到耐藥基因和可移動(dòng)遺傳元件的多重耐藥沙門氏菌進(jìn)行質(zhì)粒接合試驗(yàn),結(jié)果共獲得8株接合子,其接合成功率為57.14%(8/14)。結(jié)論:196份藏雞樣本中,沙門氏菌樣本檢出率為21.43%(42/196);42株藏雞沙門氏菌分離株共6種血清型,其中鼠傷寒沙門氏菌、雞傷寒沙門氏菌、雞白痢沙門氏菌和腸炎沙門氏菌為主要血清型:42株分離菌對(duì)21種抗菌藥物均表現(xiàn)不同程度耐藥,多重耐藥率高達(dá)97.62%,且廣泛攜帶耐藥基因和可移動(dòng)遺傳元件,其耐藥基因與可移動(dòng)遺傳元件之間存在某種相關(guān)性。
【學(xué)位授予單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S852.61
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1315314
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