本文關(guān)鍵詞：山羊IFN-γ免疫血清制備及抗體ELISA檢測(cè)方法的建立

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【摘要】：為制備山羊干擾素-γ(IFN-γ)免疫血清并建立山羊IFN-γ抗體ELISA檢測(cè)方法 ,以原核表達(dá)的山羊γIFN重組蛋白(rIFN-γ)為材料,免疫小鼠制備免疫血清;通過(guò)對(duì)測(cè)定不同的抗原包被濃度及包被時(shí)間,酶標(biāo)抗體稀釋度,免疫血清的孵育時(shí)間等條件的優(yōu)化建立檢測(cè)抗體效價(jià)的ELISA檢測(cè)方法,并采用建立的方法測(cè)定免疫血清的抗體效價(jià)。結(jié)果顯示,rIFN-γ抗原包被濃度為10μg/mL,4℃包被12h;酶標(biāo)抗體稀釋度為1∶5 000;免疫血清孵育時(shí)間為60min,可以得到最佳ELISA的檢測(cè)結(jié)果。重復(fù)試驗(yàn)顯示該方法變異系數(shù)(CV)在1.5%~5%之間。采用建立的方法測(cè)得免疫小鼠免疫血清效價(jià)為107。該ELISA檢測(cè)方法靈敏高,穩(wěn)定性好,為山羊IFN-γ抗體檢測(cè)提供了技術(shù)支持。
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【基金】：陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計(jì)劃項(xiàng)目(2015KTTSNY04-04)
【分類號(hào)】：S827
【正文快照】： γ干擾素(IFN-γ)是一種重要的細(xì)胞因子,主要參與細(xì)胞免疫[1]。病毒、細(xì)胞內(nèi)寄生菌等病原體入侵機(jī)體[2],或腫瘤細(xì)胞的產(chǎn)生[3],都會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生IFN-γ,誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞等細(xì)胞MHCⅡ類分子的表達(dá),提高抗原遞呈能力;IFN-γ也能活化巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞等,提高其對(duì)病原體

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 宋殿森;程松高;;變形h菌免疫血清的抗蔓延生長(zhǎng)的作用[J];微生物學(xué)報(bào);1959年04期

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3 毛洪斌;廬山種羊場(chǎng);蘇德海;王春元;;利用睪丸免疫血清控制細(xì)毛羊后代性別的試驗(yàn)初報(bào)[J];江西畜牧獸醫(yī)雜志;1982年02期

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6 T3安然;;流行性乙型乫炎補(bǔ)體}P合奻歐與血球凝集抑制奻歐的比，

本文編號(hào)：1288903