本文關(guān)鍵詞：豁眼鵝卵巢組織產(chǎn)蛋性能相關(guān)基因的篩選及表達分析

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【摘要】：本研究以遼寧豁眼鵝為試驗對象,首先提取產(chǎn)蛋期和休產(chǎn)期的卵巢組織總RNA,利用Illumina HiSeq 2000高通量測序技術(shù)進行測序,篩選差異表達的基因,應(yīng)用生物信息學(xué)技術(shù)對其功能進行預(yù)測性分析,然后擴增與卵巢生殖激素合成和分泌相關(guān)的3個基因：StAR、 CYP11A1, CYP19A1的部分片段。最后應(yīng)用Real-Time PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)檢測豁眼鵝產(chǎn)蛋周期不同階段卵巢組織中3個基因的表達量變化情況,并通過生物信息學(xué)分析對其進行分析,以初步闡明StAR、 CYP11A1、CYP19A1 mRNA及蛋白表達水平與豁眼鵝產(chǎn)蛋性能之間的關(guān)系。試驗結(jié)果如下：(1)成功篩選并鑒定出688個顯著差異表達基因,其中344個上調(diào)基因和344個下調(diào)基因,這些基因主要參與類固醇類激素合成、促性腺激素釋放激素信號通路、卵母細胞減數(shù)分裂、孕激素介導(dǎo)的卵母細胞成熟、類固醇合成、鈣信號傳導(dǎo)途徑等生理過程。(2)成功獲得豁眼鵝StAR、 CYP11A1、 CYP19A1基因部分目的片段,大小依次為449 bp、272 bp、 498 bp;相似性分析發(fā)現(xiàn),豁眼鵝StAR基因與鴻雁和綠頭鴨的相似性最高,分別為99%和94%；豁眼鵝CYPUA1基因與鴻雁的相似性是99%,綠頭鴨是97%。豁眼鵝CYP19A1基因與鴻雁、綠頭鴨的相似性是99%,與家雞是93%。(3)產(chǎn)蛋周期不同階段(3月份、5月份、8月份、11月份)StAR、 CYP11A1、 CYP19A1 mRNA的表達趨勢均為先上升后下降,且均為5月份表達量顯著高于其他月份,其中StAR、 CYP11A1 mRNA的表達量11月份最低,而CYP19A1則3月份最低；StAR、 CYPUA1、 CYP19A1 mRNA表達量在各月份之間差異顯著。StAR、 CYP11A1、 CYP19A1三種蛋白表達量的變化趨勢與對應(yīng)的mRNA基本一致,均表現(xiàn)為先上升后下降。本研究表明,StAR、 CYP11A1、 CYP19A1等與生殖激素合成相關(guān)的基因在豁眼鵝產(chǎn)蛋周期不同階段的卵巢組織中呈現(xiàn)出差異表達現(xiàn)象,并呈現(xiàn)一定的表達規(guī)律,推測其可能參與豁眼鵝產(chǎn)蛋和繁殖機能的調(diào)控。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S835

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本文編號：1286238