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布魯氏菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)分子BPE123和BPE275基因的原核表達(dá)與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-11-27 14:22

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【摘要】:【目的】克隆布魯氏菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)分子BPE123和BPE275的基因并進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)!痉椒ā繌呐7N布魯氏菌2308株基因組中PCR擴(kuò)增BPE123和BPE275基因片段,亞克隆到pGEM-T Easy載體中并測序。將BPE123和BPE275基因克隆至融合表達(dá)載體pET-28a,構(gòu)建表達(dá)重組質(zhì)粒pET-28a-BPE123和pET-28aBPE275,在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),Western blot分析重組蛋白His-BPE123和His-BPE275的免疫學(xué)特性!窘Y(jié)果】PCR擴(kuò)增獲得了462bp的BPE123基因片段和762bp的BPE275基因片段,成功構(gòu)建了pET-28a-BPE123、pET-28a-BPE275原核表達(dá)載體,并在大腸桿菌中成功表達(dá)了BPE123和BPE275蛋白,經(jīng)SDS-PAGE檢測,重組融合蛋白BPE123、BPE275的分子質(zhì)量分別約為22和31ku,布魯氏菌免疫動(dòng)物血清能特異性識(shí)別表達(dá)的蛋白!窘Y(jié)論】克隆了分泌蛋白BPE123、BPE275基因片段,并成功表達(dá)了布魯氏菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)分子BPE123和BPE275。
【作者單位】: 石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院動(dòng)物疾病防控兵團(tuán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31360610) 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)國際合作項(xiàng)目(2013BC005) 石河子大學(xué)杰出青年項(xiàng)目(2012ZRKXJQ02)
【分類號(hào)】:S852.61
【正文快照】: them.布魯氏菌病(Brucellosis)簡稱為布病,其致病菌為布魯氏桿菌(Brucella)。布魯氏桿菌是一種革蘭氏陰性、兼性胞內(nèi)寄生菌,它可以感染人和動(dòng)物,人主要表現(xiàn)為持續(xù)性感染并常伴有關(guān)節(jié)炎和心內(nèi)膜炎等癥狀;動(dòng)物感染后,公畜表現(xiàn)為睪丸腫脹,母畜表現(xiàn)為不孕或流產(chǎn)。作為胞內(nèi)寄生菌,,

本文編號(hào):1232148

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