本文關(guān)鍵詞：NCG促進性發(fā)育的動物模型建立及機理研究

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【摘要】：在規(guī)�；B(yǎng)豬場中頻頻發(fā)生后備母豬初情期啟動遲緩、不發(fā)情,甚至是屢屢配種失敗的現(xiàn)象。本實驗就NCG對動物性發(fā)育的影響及其機理進行了初步探究,設(shè)計了兩個實驗。實驗一:評估NCG在促進動物性發(fā)育過程中的作用。選取SPF級SD雌性斷奶大鼠60只,隨機分為對照組、0.05%NCG組和0.1%NCG組;實驗組(0.05%NCG和0.1%NCG)在30日齡開始飼喂添加NCG的日糧,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧;65日齡時(初情期前)雌雄SD大鼠合籠,觀察陰栓形成情況,確定初情期并配種;記錄產(chǎn)仔及21日齡斷奶仔數(shù)并跟蹤至第二胎產(chǎn)仔。與對照組相比,日糧中添加NCG可使SD雌性大鼠初情期提前3.5d~4.2d(P0.05);初情期時配種第一胎產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)均無顯著差異(P0.05);添加NCG可增加斷奶成活數(shù)2.0只~2.8只(P0.05)。實驗組和對照組第二胎產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、初生均重均無顯著差異(P0.05)。由此可見,日糧中添加NCG可使SD雌性大鼠初情期提前并能增加斷奶成活數(shù),NCG可促進SD雌性大鼠性發(fā)育,從而獲得真性性早熟。實驗二:基于NCG在促進動物性發(fā)育過程中的作用,采用體外GnRH細胞模型——GT1-7神經(jīng)元細胞,研究不同雌激素(E_2)添加水平和添加時間對GT1-7細胞GnRH合成和分泌的影響,以及對初情期啟動相關(guān)基因(ERα、KISS-1、GPR54、GnRH等)表達的影響。體外培養(yǎng)GT1-7細胞,對照組不做任何處理只添加溶劑(無水乙醇),實驗組添加不同濃度E_2并處理不同時間,收集培養(yǎng)上清液和細胞,利用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定上清液中GnRH濃度并利用相對熒光定量法測定目的基因的表達。不同時間(6-30h),不同濃度(10-11-10-5M)E_2處理GT1-7細胞,可不同程度的刺激和抑制GnRH的分泌和GnRH、ERα、KISS-1、GPR54 mRNA表達,其中以12h 100pM E_2對GT1-7細胞GnRH分泌和GnRH、KISS-1 mRNA等的表達具有明顯的促進作用;24h1μM E_2對GT1-7細胞GnRH分泌和GnRH、KISS-1 mRNA等表達具有明顯的抑制作用。在此基礎(chǔ)上,初步建立了E_2調(diào)控GnRH分泌的體外細胞模型,即100pM E_2處理12h促進GnRH分泌的模型和1μM E_2處理24h抑制GnRH分泌的模型,為進一步研究動物性發(fā)育和初情期啟動提供應(yīng)理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S814

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本文編號：1231562