本文關鍵詞：過氧化氫誘導豬卵巢顆粒細胞自噬及其對凋亡的影響

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【摘要】：[目的]本試驗旨在研究抑制氧化應激誘導的自噬對豬卵巢顆粒細胞凋亡的作用。[方法]采用流式細胞術和細胞計數試劑盒(cell counting kit-8,CCK8)檢測不同濃度(0、50、100和150μmol·L~(-1))過氧化氫處理12 h對豬顆粒細胞的凋亡誘導作用和細胞活力的影響;Western-blot檢測微管相關蛋白1輕鏈3(LC3,包括LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ)和自噬相關蛋白P62/SQSTM1的表達量變化,轉染GFP-LC3質粒檢測自噬體的數量;利用3-甲基腺嘌呤(3-MA)提前4 h抑制自噬后再氧化應激12 h,用流式細胞術檢測細胞的凋亡率,CCK8檢測細胞活力。[結果]氧化應激12 h后,細胞活力隨過氧化氫濃度提高顯著降低,凋亡率顯著上升。在氧化應激前6 h LC3-Ⅱ相對表達量先增加后減少,P62的相對表達量先減少再增加;轉染GFP-LC3質粒后,自噬體數量極顯著上調,6 h后顯著下降,上述結果表明在氧化應激早期自噬增加,持續(xù)氧化應激自噬受到抑制。若提前4 h用3-MA抑制自噬,再用過氧化氫處理12 h,抑制自噬后細胞凋亡率較單獨氧化應激組顯著下降,細胞活力也顯著上升。[結論]氧化應激能誘導豬卵巢顆粒細胞的凋亡和早期自噬,若抑制早期自噬,凋亡率會下降。
【作者單位】： 南京農業(yè)大學動物科技學院;
【基金】：國家973計劃項目(2014CB138502)
【分類號】：S828
【正文快照】： 在哺乳動物中,卵泡閉鎖是一種正常的生理過程,研究卵泡閉鎖有助于提高動物的繁殖力。現在人們普遍認為卵巢顆粒細胞凋亡能導致卵泡閉鎖[1],因此研究顆粒細胞凋亡具有重要意義�；钚匝�(reactiveoxygen species,ROS)是動物繁殖過程中一種代謝副產物,如果雌性動物卵泡中ROS的生成

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