發(fā)布時間：2017-10-29 17:02

  本文關(guān)鍵詞：小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞中HOXA10調(diào)控DNM1L表達(dá)機制的研究

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【摘要】：[目的]本文旨在研究轉(zhuǎn)錄因子同源框A10基因(HOXA10)結(jié)合動力蛋白基因(DNM1L)啟動子區(qū)域綁定位點,并調(diào)控DNM1L基因的表達(dá)機制。[方法]通過轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)站(TFSITESCAN)預(yù)測DNM1L啟動子區(qū)域存在HOXA10的結(jié)合位點。分離懷孕1~7 d的小鼠子宮內(nèi)膜,采用RT-q PCR檢測其HOXA10和DNM1L mRNA表達(dá)量的變化規(guī)律。結(jié)合HOXA10過表達(dá)和siRNA干擾試驗,分析小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞中HOXA10 mRNA表達(dá)量的變化如何影響DNM1L表達(dá)。構(gòu)建DNM1L野生型和綁定位點突變型啟動子區(qū)域(-1 749~-2 033 bp)熒光素酶報告載體,分別與HOXA10過表達(dá)載體和siRNA共轉(zhuǎn)染到小鼠3T3細(xì)胞,檢測DNM1L啟動子區(qū)熒光素酶活性值變化。[結(jié)果]網(wǎng)站(TFSITESCAN)預(yù)測DNM1L在轉(zhuǎn)錄起始位點上游-1 767 bp的位置存在HOXA10轉(zhuǎn)錄結(jié)合位點。HOXA10 mRNA表達(dá)量在懷孕4 d小鼠的子宮內(nèi)膜中達(dá)到峰值,DNM1L mRNA表達(dá)量則在懷孕3 d時達(dá)到峰值。HOXA10過表達(dá)和siRNA干擾試驗結(jié)果表明:基質(zhì)細(xì)胞中HOXA10表達(dá)量升高或降低能相對應(yīng)降低或提高DNM1L表達(dá)水平(P0.01)。雙熒光素酶活性試驗結(jié)果表明:HOXA10過表達(dá)載體和siRNA分別與野生型DNM1L報告載體共轉(zhuǎn)染細(xì)胞,前者熒光活性值極顯著下降,后者熒光活性值極顯著上升(P0.01)。突變型DNM1L報告載體對熒光活性值無明顯影響(P0.05)。[結(jié)論]HOXA10可結(jié)合于DNM1L啟動子區(qū)域,并調(diào)控DNM1L基因表達(dá)。
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 同源框A基因(HOXA) 動力蛋白基因(DNML) 小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞
【分類號】：S814
【正文快照】： 胚胎著床是一個復(fù)雜的生理過程,是決定妊娠成功與否的關(guān)鍵,它的成功主要取決于胚胎能否成功植入到處于容受狀態(tài)下的子宮內(nèi)膜。因為胚胎發(fā)育到特定時期才具有入侵子宮內(nèi)膜的能力,而子宮內(nèi)膜也在這一特定時期才允許胚胎植入,所以二者必須同步健康發(fā)育。胚胎著床包括胚泡脫去透明，

本文編號：1113837