本文關鍵詞：荷斯坦奶牛乳腺組織凍存及乳腺上皮細胞原代培養(yǎng)技術改進

  更多相關文章： 乳腺上皮細胞 側(cè)置處理 組織凍存 原代培養(yǎng) 奶牛

【摘要】：為了改進奶牛乳腺上皮細胞原代培養(yǎng)技術和探究乳腺組織凍存方法,選用24月齡無泌乳史荷斯坦奶牛,采用組織塊種植法,通過側(cè)置和倒置兩種方式,分別從新鮮和凍存(8個月)的乳腺組織中分離培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細胞。結果表明,側(cè)置處理能使乳腺細胞爬出時間縮短1~2d,并改善組織塊貼壁速度和效果;回收于前次培養(yǎng)后的乳腺組織塊再分離培養(yǎng),貼壁第2天即有乳腺上皮細胞爬出;一步冷凍(-80℃)液氮保存較大奶牛乳腺組織塊,凍存液A(FBS∶DMSO∶DMEM/F12=7∶2∶1)凍存的組織塊存活率為50%,凍存液B(FBS∶DMEM/F12∶DMSO∶HEPES/丙酮酸鈉貯存液=10∶7∶2∶1)凍存的組織塊存活率為56%�？梢�,作者建立的側(cè)置處理法和組織塊回收法可以用于奶牛乳腺上皮細胞的分離培養(yǎng),可以縮短組織塊種植法實驗周期,凍存液中加入緩沖液HEPES/丙酮酸鈉后有利于組織塊生物活性保持。
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所甘肅省中獸藥工程技術研究中心;
【關鍵詞】： 乳腺上皮細胞 側(cè)置處理 組織凍存 原代培養(yǎng) 奶牛
【基金】：國家奶牛產(chǎn)業(yè)技術體系(CARS37) 公益性行業(yè)專項(20130304)
【分類號】：S823
【正文快照】： 體外培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細胞適宜建立細胞模型,是開展生理、病理、藥理等研究的重要實驗材料。國外已有成熟永生化奶牛乳腺上皮細胞系,如MAC-T、BME-UV1[1-2]。國內(nèi)也有永生化奶牛乳腺細胞系研究的報道,如朱佳杰、李吉霞、上官陶、代瑞等通過轉(zhuǎn)染hTert、SV40T等獲得永生化乳腺

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3 張U，

本文編號：1026372