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進(jìn)出口動物中新霉素ELISA檢測方法的建立

發(fā)布時間:2017-10-11 00:37

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【摘要】:應(yīng)用碳二亞胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶聯(lián)新霉素,通過方陣試驗(yàn)確定最佳抗原包被濃度與抗體稀釋倍數(shù),以新霉素質(zhì)量濃度對數(shù)為橫坐標(biāo)、抗體抑制率為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立了進(jìn)出口食用動物中新霉素ELISA快速檢測技術(shù),并對建立的方法進(jìn)行了回收率和特異性試驗(yàn)。結(jié)果表明,建立的檢測方法包被人工合成抗原的最適稀釋度為1∶200,抗體的最佳稀釋度為1∶2 000,半數(shù)抑制濃度(IC50)為6.99ng/mL;該方法的最低檢測限達(dá)40ng/mL,與慶大霉素、卡那霉素、鏈霉素、托普霉素、阿米卡星、雙氫鏈霉素的交叉反應(yīng)率均小于0.1%,平均加標(biāo)回收率83.77%。標(biāo)準(zhǔn)曲線在1.5~40ng/mL范圍內(nèi)是線性的,相關(guān)系數(shù)為0.987,標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=-37.66x+94.592;與常規(guī)液相檢測方法相比操作簡單、快速。本研究建立了一種快速、高效、特異的新霉素ELISA檢測方法。
【作者單位】: 山東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;濰坊出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【關(guān)鍵詞】進(jìn)出口食用動物 新霉素 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 檢測方法
【基金】:CNCA檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制定計(jì)劃項(xiàng)目(2014B369)
【分類號】:S859.84
【正文快照】: 新霉素是氨基糖苷類抗生素,對革蘭氏陰性和陽性菌均有很好的抑殺作用。在畜牧和水產(chǎn)中,該類抗生素不但被廣泛用于防制各種動物疾病,而且常常添加到飼料中[1],用于促進(jìn)動物生長發(fā)育。氨基糖苷類抗生素的作用機(jī)理主要是抑制蛋白質(zhì)的合成,其在動物性食品中殘留可能會引起過敏,長

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本文編號:1009560

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