牛呼吸道綜合癥多重PCR檢測方法的建立
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【摘要】:為了建立針對BRDC常見的主要病原牛黏膜病病毒(BVDV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)和牛呼吸道合胞體病毒(BRSV)的一步法多重RTPCR,引入了新型的具有反轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶活性的r Tth DNA聚合酶,通過對退火溫度和引物濃度的優(yōu)化,敏感性和特異性的檢測,最終確定最佳退火溫度為54.5℃,最佳引物濃度為0.6 u M。對BPIV-3、BRSV和BVDV的最小檢測量分別為162、16和21個TCID50/0.1 m L。與牛傳染性鼻氣管炎病毒、冠狀病毒、腺病毒,以及多殺性巴氏桿菌、肺炎鏈球菌、化膿隱秘桿菌、溶血性曼氏桿菌等沒有交叉反應(yīng)。建立起的m RT-PCR檢測方法可用于鼻腔分泌物的檢測,為進一步m RT-PCR試劑盒的組裝奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】: 牛呼吸道綜合癥 病毒 mRT-PCR
【基金】:黑龍江省教育廳項目(12531471)
【分類號】:S858.23
【正文快照】: 牛呼吸道綜合癥(bovine respiratory diseasecomplex,BRDC)是多因素的,環(huán)境條件與多種病毒和細菌性病原的共同作用使牛產(chǎn)生嚴重的呼吸道疾病。應(yīng)激因素像溫度、飼養(yǎng)密度、灰塵、濕度和長途運輸?shù)萚1-2],能夠?qū)е聶C體免疫力下降,繼而感染機會性病毒或者細菌性病原。國內(nèi)外研究表
【相似文獻】
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,本文編號:1003774
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