本文關(guān)鍵詞：帚霉新種所致暗色絲孢霉病的臨床與實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:暗色絲孢霉病(Phaeohyphomycosis),系暗色真菌引起的淺表組織,皮膚,角膜,皮下組織甚至系統(tǒng)性感染。暗色真菌通常為土壤腐生菌和植物病原菌,其孢子廣泛存在于空氣中,其中許多為實(shí)驗(yàn)室常見的污染菌,在人體表面可有短暫的停留。當(dāng)機(jī)體免疫力低下,或患有糖尿病、白血病或長期服用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素時(shí),病原菌可經(jīng)肺,皮膚傷口進(jìn)入人體引起感染,甚至可以經(jīng)血液循環(huán)播散至全身引起系統(tǒng)性感染。其中一些具有親神經(jīng)性,易侵犯腦和腦膜,引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變。本文從1例引起皮下暗色絲孢霉病的帚霉新種的分離鑒定開始,圍繞其表型特征、體外藥敏、分子鑒定等方面進(jìn)行了研究。第一部分:報(bào)告1例由帚霉新種所致的暗色絲孢霉病并對(duì)該菌進(jìn)行分離鑒定和臨床實(shí)驗(yàn)研究�；颊吣�,52歲,左手側(cè)緣疣狀增生性斑塊7年余。發(fā)病前虎口部有外傷史。期間曾予冷凍治療,效不佳。查體:左手掌外側(cè)緣境界清楚疣狀高度增生性斑塊,表面粗糙顆粒狀,少量干燥性血痂,中央皮損部分消退呈環(huán)狀。真菌鏡檢見細(xì)長分隔菌絲,未見硬殼小體;真菌培養(yǎng)可見生長緩慢的暗黑色菌落形成,表面形成放射狀皺褶伴培養(yǎng)基開裂;組織病理學(xué)檢查示表皮角化過度,假上皮瘤樣增生,真皮內(nèi)混合性炎癥細(xì)胞浸潤為主的感染性肉芽腫�；贗TS測序的BLAST分析顯示該菌株位于帚霉屬的獨(dú)立分支。診斷:帚霉新種所致皮下暗色絲孢霉病。治療采用斯皮仁諾(伊曲康唑)400mg/日和阿維A 20mg/日口服3個(gè)月后,皮損完全消退。隨訪半年無復(fù)發(fā)。第二部分:抗真菌藥物體外對(duì)抗帚霉新種的敏感性及表型研究:將從臨床患者皮損分離出的帚霉新種分別接種于不同培養(yǎng)基上,觀察其菌落形態(tài),生長速率。玻片小培養(yǎng)及掃描電鏡鏡下觀察其菌絲及孢子形態(tài)。參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSI)的針對(duì)產(chǎn)孢絲狀真菌的M38-A2方案進(jìn)行體外藥敏試驗(yàn)。結(jié)果示:此帚霉新種在不同培養(yǎng)基上表現(xiàn)為不同形態(tài)的菌落,在GC培養(yǎng)基上生長最快,PDA、SDA、MEA培養(yǎng)基上產(chǎn)孢較多。玻片小培養(yǎng)示:淡棕色分支分隔菌絲,分生孢子梗直立,帚狀枝疏散分布,瓶梗頂端產(chǎn)生長短不一、松散性分生孢子鏈。電鏡示:末端膨大的瓶梗,成串的分生孢子鏈及帚狀枝。溫度耐受試驗(yàn)示此帚霉新種在37℃下生長良好。體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果示此菌株對(duì)伊曲康唑及特比萘芬敏感。第三部分:帚霉新種的分子鑒定:DNA提取、擴(kuò)增及測序,將PCR擴(kuò)增片段送到上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司純化并雙向測序。隨后將測序結(jié)果進(jìn)行種系發(fā)生分析。ITS和LSU測序分別獲得567 bp和580 bp的片段,相應(yīng)序列結(jié)果已上傳至GenBank,分別獲得序列號(hào)KP764411和KR006348。基于ITS及LSU的序列結(jié)果與其近源的帚霉屬菌種的序列資料構(gòu)建種系發(fā)生樹。結(jié)果顯示該菌株位于帚霉屬內(nèi)單獨(dú)分支上。結(jié)論:1.本病例為帚霉新種所致的暗色絲孢霉病,經(jīng)伊曲康唑及阿維A治療后完全好轉(zhuǎn)。隨訪半年無復(fù)發(fā)。2.經(jīng)表型觀察,此帚霉新種在各培養(yǎng)基上生長情況各不相同;體外藥敏試驗(yàn)示其對(duì)特比萘芬及伊曲康唑敏感。溫度耐受試驗(yàn)顯示37℃下培養(yǎng)7天可見菌落生長良好。3.分子鑒定:給予ITS及LSU測序結(jié)果構(gòu)建種系發(fā)生樹,結(jié)果顯示該菌株位于帚霉屬內(nèi)獨(dú)立分支上。
【關(guān)鍵詞】：帚霉 暗色絲孢霉病 體外藥敏 分子鑒定
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R756
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-15
• 參考文獻(xiàn)13-15
• 第一部分 帚霉新種所致暗色絲孢霉病的臨床研究15-26
• 材料與方法15-20
• 結(jié)果20-22
• 討論22-24
• 參考文獻(xiàn)24-26
• 第二部分 抗真菌藥物體外對(duì)抗帚霉新種的敏感性及表型研究26-39
• 材料與方法26-32
• 結(jié)果32-35
• 討論35-37
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 第三部分 帚霉新種的分子鑒定39-50
• 材料與方法39-41
• 結(jié)果41-47
• 討論47-49
• 參考文獻(xiàn)49-50
• 結(jié)論50-51
• 綜述51-70
• 參考文獻(xiàn)59-70
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況70-71
• 致謝71-72

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本文編號(hào)：399600