Ⅱ型單純皰疹病毒(herpes simplex virus type 2,HSV-2)和水痘-帶狀皰疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)同屬于α皰疹病毒亞科,都可以引起人類疾病。HSV-2主要導致嚴重的生殖器疾病,與生理疾病(如生殖器潰瘍和炎癥)和心理社會問題有關(guān)。目前可用的抗病毒藥物有一定的局限性,而且尚未研制出可用的疫苗。VZV是引起水痘-帶狀皰疹的主要病原體。VZV病毒可以神經(jīng)潛伏,在宿主免疫低下時會重新復發(fā),且會引起帶狀皰疹后神經(jīng)痛。感染VZV病毒后的治療,急需開發(fā)新的治療方法,尋找新的抗病毒機制。miRNA是一種小的非編碼RNA分子,可以通過靶向mRNA調(diào)控基因表達參與許多細胞過程。病毒感染的宿主細胞可以調(diào)節(jié)細胞miRNA的表達,通過直接與病毒基因組結(jié)合或通過調(diào)節(jié)先天免疫途徑和細胞因子反應抑制病毒復制。例如,miR-101可以通過靶向ATP合酶亞單位(ATP5B)抑制HSV-1復制。miRNA在對抗病毒感染的應用中有巨大的潛能,但由于缺少有效的遞送系統(tǒng),miRNA的應用存在阻礙。外泌體是一種脂質(zhì)雙分子層包被的納米囊泡,直徑約為30-150nm。外泌體...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
abstract
縮略詞表
第一章 前言
    1.1 皰疹病毒
        1.1.1 皰疹病毒
        1.1.2 Ⅱ型單純皰疹病毒
        1.1.3 水痘帶狀皰疹病毒
    1.2 miRNA抗病毒
        1.2.1 miRNA簡介
        1.2.2 miRNA調(diào)節(jié)皰疹病毒復制
    1.3 外泌體遞送系統(tǒng)
        1.1.1 外泌體概述
        1.1.2 外泌體分泌機制和組成
        1.1.3 外泌體分離與表征
        1.1.4 外泌體作為體內(nèi)藥物遞送載體
    1.4 立題依據(jù)和創(chuàng)新點
        1.4.1 立體依據(jù)
        1.4.2 創(chuàng)新點
    1.5 實驗設(shè)計
第二章 外泌體負載MIR-101 抑制HSV-2 復制
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株、病毒株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 引物使用
    2.2 實驗方法
        2.2.1 Hela細胞培養(yǎng)
        2.2.2 miR-101 轉(zhuǎn)染細胞試驗
        2.2.3 細胞免疫熒光實驗
        2.2.4 MTT檢測細胞活性
        2.2.5 HSV-2病毒擴增及滴度測定
        2.2.6 qPCR檢測細胞中HSV-2 病毒DNA表達量
        2.2.7 蛋白免疫印記法
        2.2.8細胞免疫熒光實驗
        2.2.9 差速離心法分離細胞上清液的外泌體
        2.2.10 透射電鏡(Transmission electron microscope,TEM)
        2.2.11 外泌體負載miR-101 方法
        2.2.12 RT-PCR檢測外泌體中miRNA
        2.2.13 免疫熒光共聚焦
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 miRNA101 抑制HSV-2 病毒復制
        2.3.2 外泌體負載miRNA101
        2.3.3 外泌體遞送miRNA101 抑制HSV-2 病毒復制
    2.4 小結(jié)
第三章 外泌體遞送MIR-101 抑制VZV復制
    3.1 實驗材料
        3.1.1 病毒株、細胞株
        3.1.2 試劑和儀器
        3.1.3 引物使用
    3.2 實驗方法
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 miR-101 抑制VZV病毒的復制
        3.3.2 MRC5 細胞上清液外泌體表征
        3.3.3 外泌體遞送miR-101 抑制VZV病毒復制
    3.4 小結(jié)
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及科研成果
致謝



本文編號：3920104