背景布魯菌病(簡(jiǎn)稱布病),是由布魯菌(簡(jiǎn)稱布菌)引起的一種嚴(yán)重的人畜共患傳染病。人感染布菌后容易轉(zhuǎn)為慢性,引起多器官損傷。目前布病的實(shí)驗(yàn)室診斷主要以血清學(xué)檢測(cè)抗體為主,存在不同程度的交叉反應(yīng),不能真實(shí)地反映患者胞內(nèi)的攜菌情況。布病的病原學(xué)檢測(cè)以菌培養(yǎng)作為“金標(biāo)準(zhǔn)”,但其分離率較低,操作存在較大的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。核酸檢測(cè)也是當(dāng)前的研究熱點(diǎn),其操作的簡(jiǎn)便性尚不能滿足大多臨床診斷要求。直接檢測(cè)布病患者細(xì)胞內(nèi)的病原體或布菌抗原,對(duì)于布病的診斷和治療效果評(píng)價(jià)具有重要意義。然而,這一領(lǐng)域的研究報(bào)道尚不多見(jiàn)。目的本研究擬通過(guò)制備、篩選和鑒定特異性布菌外膜蛋白單克隆抗體,建立針對(duì)布病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)內(nèi)布菌抗原的流式細(xì)胞檢測(cè)方法,用于布病臨床治療效果評(píng)價(jià)。方法1.材料重組布菌外膜蛋白Omp31、Bp26和Omp25;布菌外膜蛋白特異性單克隆抗體及其雜交瘤細(xì)胞;滅活布菌菌體,包括牛種(B.abortus 2308、104M和S19菌株),羊種(B.melitensis M5-90)和豬種(B.suis S2);異硫氰酸熒光素(FITC),藻紅蛋白(r-PE)標(biāo)記試劑盒。2.研究對(duì)象52名布...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

圖１－４抗Ｏｍｐ２５單抗的抗原識(shí)別表位??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?Ｅｐｉｔｏｐｅ?ｍａｐｐｉｎｇ?ｏｆ?Ｏｍｐ２５??Ａ、ＥＬＩＳＡＭＡｂｓＯｍ２５；Ｂ、ＭＡｂＯｍ２５，??

圖２－１?Ｏｍｐ２５、Ｂｐ２６和Ｏｍｐ３１重組表達(dá)載體雙酶切鑒定??

圖３－２不同抗體用量時(shí)ＦＣＭ檢測(cè)的２９３ＦＴ陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)??

圖３－４流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)健康獻(xiàn)血者ＰＢＭ?

本文編號(hào)：3887568