目的通過正交試驗優(yōu)化流感病毒蔗糖密度梯度離心純化工藝條件。方法以影響流感病毒純化效果的蔗糖溶液用量、上樣量、超速離心時間及上樣速度為試驗因素,每因素設(shè)3個水平,通過正交試驗設(shè)計9組試驗。每組試驗流感病毒濃縮液純化后獲得的樣品進行血凝滴度及蛋白含量檢測,計算血凝滴度收率和蛋白去除率;根據(jù)正交試驗血凝滴度收率、R值及K值結(jié)果,確定最適純化工藝參數(shù)。采用最適純化工藝對中試3批流感病毒濃縮液進行純化。結(jié)果正交試驗結(jié)果表明,影響流感病毒純化效果因素的重要性依次為超速離心時間、蔗糖溶液用量、上樣量、上樣速度,最適純化工藝參數(shù)為超速離心時間3 h,30%蔗糖溶液用量500 mL/臺,上樣量為700 mL/臺,上樣速度為60 m L/min。3批中試病毒濃縮液純化后的血凝滴度收率均> 90%,滿足工藝需求。結(jié)論采用正交試驗獲得的流感病毒純化工藝適合于規(guī)模化生產(chǎn)。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 病毒
    1.2 雞胚
    1.3 主要試劑及儀器
    1.4 病毒接種及培養(yǎng)
    1.5 病毒液濃縮收集
    1.6 血凝滴度檢測
    1.7 蛋白質(zhì)含量檢測
    1.8 正交試驗設(shè)計
    1.9 純化工藝條件驗證
2 結(jié)果
    2.1 正交試驗
        2.1.1 檢測結(jié)果
        2.1.2 結(jié)果分析
    2.2 純化工藝參數(shù)驗證
3 討論



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