目的探討嗅素蛋白4（OLFM4）對(duì)卡介苗（BCG）感染的巨噬細(xì)胞RAW264.7凋亡及BCG存活率的影響及機(jī)制。方法采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)OLFM4 mRNA表達(dá)水平。采用免疫印跡法檢測(cè)OLFM4及凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax的表達(dá)。采用平板菌落計(jì)數(shù)法分析BCG存活率,通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)評(píng)估巨噬細(xì)胞凋亡率。結(jié)果 BCG感染的巨噬細(xì)胞RAW264.7中OLFM4 mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著升高,并呈時(shí)間依賴性。此外,敲除OLFM4能夠抑制BCG誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,同時(shí)增加抑凋亡蛋白Bcl-2表達(dá),降低促凋亡蛋白Bax的表達(dá)。OLFM4沉默使RAW264.7細(xì)胞中BCG生存率明顯升高。機(jī)制研究結(jié)果顯示,下調(diào)OLFM4可抑制p-p65和TLR2的表達(dá),進(jìn)而阻斷TLR2/NF-κB信號(hào)通路。結(jié)論沉默OLFM4可能通過阻斷TLR2/NF-κB信號(hào)通路抑制BCG誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞RAW264.7凋亡,從而增加BCG存活率,初步闡明了OLFM4在巨噬細(xì)胞抗BCG感染中的作用機(jī)制,為結(jié)核�。═B）的診斷和治療奠定了理論基礎(chǔ)。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 BCG感染小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7
        1.2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        1.2.4 RT-PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)水平
        1.2.5 免疫印跡法檢測(cè)蛋白表達(dá)
        1.2.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.2.7 BCG生存力檢測(cè)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 OLFM4在BCG誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞RAW264.7中的表達(dá)
    2.2 OLFM4對(duì)BCG誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡的影響
    2.3 OLFM4對(duì)巨噬細(xì)胞RAW264.7中BCG存活率的影響
    2.4 沉默OLFM4阻斷BCG介導(dǎo)的TLR2/NF-κB信號(hào)通路
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