2015年以來(lái),寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）感染被報(bào)告和小頭癥之間存有關(guān)聯(lián),已有多個(gè)國(guó)家和地區(qū)報(bào)告ZIKV感染證據(jù),我國(guó)持續(xù)面對(duì)ZIKV輸入風(fēng)險(xiǎn)。為發(fā)展適用于現(xiàn)場(chǎng)的快速高效的ZIKV核酸檢測(cè)方法,選取ZIKV NS1片段保守區(qū)設(shè)計(jì)特異性引物探針,經(jīng)優(yōu)化建立了多種功能蛋白介導(dǎo)的ZIKV RNA恒溫快速擴(kuò)增檢測(cè)方法。利用所制備的ZIKV NS1片段體外轉(zhuǎn)錄RNA作為參考品,并與實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。同時(shí)利用ZIKV細(xì)胞培養(yǎng)物中加入健康人血清制備的模擬臨床標(biāo)本進(jìn)行初步驗(yàn)證。結(jié)果顯示,建立的RNA恒溫快速擴(kuò)增檢測(cè)方法可100%檢出100拷貝/μL體外轉(zhuǎn)錄RNA,可在15 min以?xún)?nèi)判讀,大大低于PCR的常規(guī)檢測(cè)時(shí)間;用該方法檢測(cè)其他相關(guān)病毒,無(wú)交叉反應(yīng)。病毒滴度在（10~4～10~7PFU/mL）之間的模擬臨床病人標(biāo)本可達(dá)到100%檢出。本研究建立的ZIKV RNA恒溫?cái)U(kuò)增快速檢測(cè)方法快速、靈敏、特異,適用于ZIKV現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)急檢測(cè),為ZIKV的防控提供了重要的技術(shù)支撐。 

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)?zāi)０寮皹颖?br>    2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
        2.1 試劑
        2.2 儀器
    3 引物探針設(shè)計(jì)
    4 實(shí)時(shí)熒光RNA恒溫快速擴(kuò)增
    5 靈敏性評(píng)價(jià)
    6 特異性評(píng)價(jià)
    7 模擬臨床標(biāo)本驗(yàn)證
結(jié)果
    1引物探針篩選結(jié)果
    2靈敏性評(píng)價(jià)
    3特異性評(píng)價(jià)
    4模擬臨床標(biāo)本驗(yàn)證
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3665014