目的:1)檢測hsa-miR-125b-5p在泡型包蟲病患者的血清及肝臟病灶邊緣帶組織中的表達(dá);2)體外慢病毒轉(zhuǎn)染Huh7細(xì)胞使hsa-miR-125b-5p過表達(dá),檢測細(xì)胞增殖活力的改變;3)初步預(yù)測和分析hsa-miR-125b-5p的靶基因,為進(jìn)一步尋找泡型包蟲病早期診斷的分子標(biāo)志物提供一定的理論基礎(chǔ)。方法:1)利用熒光定量PCR檢測22份泡型肝包蟲病患者及22份健康對照血清中hsa-miR-125b-5p的相對表達(dá)量;2)利用熒光定量PCR檢測16個泡型包蟲病患者肝病灶的邊緣帶與遠(yuǎn)離病灶的肝組織中hsa-miR-125b-5p的相對表達(dá)量;3)構(gòu)建慢病毒載體轉(zhuǎn)染Huh7細(xì)胞,使hsa-miR-125b-5p過表達(dá),用CCK-8試劑盒處理轉(zhuǎn)染后的Huh7細(xì)胞,然后用酶標(biāo)儀檢測450nm波長處的OD值,統(tǒng)計(jì)分析得出其增殖活力是否發(fā)生變化;4)用miRDB、star Base、miRwalk和miRTarbase四個數(shù)據(jù)庫資源預(yù)測hsa-miR-125b-5p可能的靶基因,并進(jìn)行整合。然后利用Enrichr數(shù)據(jù)庫、KEGG數(shù)據(jù)庫和STRING數(shù)據(jù)庫進(jìn)行GO分析、通路分析和構(gòu)建靶蛋白的... 

【文章來源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

血清中hsa-miR-125b-5p及內(nèi)參U6的擴(kuò)增曲線

8圖2血清中hsa-miR-125b-5p及內(nèi)參U6的溶解曲線Figure2Dissolutioncurveofhsa-miR-125b-5pandinternalreferenceU6inserum1.2.2血清中hsa-miR-125b-5p的相對表達(dá)量如表2所示，實(shí)驗(yàn)組與對照組的相對表達(dá)量分別為2.440±0.753和1.032±0.262，說明hsa-miR-125b-5p在泡型包蟲病患者組血清中的表達(dá)量要高于健康對照組。柱狀圖見圖3。表2實(shí)時熒光定量pcr數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表（血清）Table2StatisticstableofRT-qPCR（serum）組別性別年齡例數(shù)相對表達(dá)量P值實(shí)驗(yàn)組男42.09±14.54112.440±0.753P<0.0001女42.54±10.9911對照組男55.72±12.74111.032±0.262女49.27±12.7411

11圖4肝組織中hsa-miR-125b-5p及內(nèi)參U6的擴(kuò)增曲線Figure4Amplificationcurveofhsa-miR-125b-5pandinternalreferenceU6inliver圖5肝組織中hsa-miR-125b-5p及內(nèi)參U6的溶解曲線Figure5Dissolutioncurveofhsa-miR-125b-5pandinternalreferenceU6inliver2.2.2肝組織中hsa-miR-125b-5p的相對表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組相對表達(dá)量為1.932±0.682，對照組相對表達(dá)量為1.001±0.049，表明泡型包蟲病患者肝病灶邊緣帶中的hsa-miR-125b-5p表達(dá)量要高于自身遠(yuǎn)離病灶的肝組織，跟血清中的表達(dá)趨勢相同。具體統(tǒng)計(jì)見表3，柱狀圖見圖6。表3實(shí)時熒光定量pcr數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表（肝）Table3StatisticstableofRT-qPCR（liver）組別年齡例數(shù)相對表達(dá)量P值實(shí)驗(yàn)組45.05±11.55161.932±0.682P<0.0001對照組1.001±0.049

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3444776