H7N9禽流感病毒感染自從2013年春季爆發(fā)以來,已有5波流行病學爆發(fā)的報道,導致近1500多例感染報道,死亡人數(shù)達500多例,給人們的生命財產(chǎn)帶來了嚴重的威脅。相關(guān)研究表明,禽類貿(mào)易和活禽市場體系是H7N9禽流感病毒感染持續(xù)爆發(fā)的主要原因之一。H7N9禽流感病毒為新型重組病毒,其中血凝素HA（Hemagglutinin）來自于家鴨攜帶的H7N3流感病毒,神經(jīng)氨酸酶NA（Neuraminidase）來自于野生鳥類攜帶的H7N9流感病毒,其余重組基因來自于家禽攜帶的H9N2流感病毒。H7N9禽流感病毒感染人體后,可以導致全身炎癥反應,出現(xiàn)呼吸窘迫綜合征（ARDS）、休克以及多臟器功能衰竭等嚴重癥狀。因此,深入研究并揭示H7N9禽流感病毒導致的臨床病毒性并發(fā)癥的發(fā)病機制,對于H7N9禽流感病毒感染的預防、診斷和治療具有重要意義。宿主天然免疫系統(tǒng)是機體在長期進化過程中形成的可以抵抗病原微生物感染的防御機制,也是機體接收外界病原微生物感染信號以及清除病原體的“第一道防線”。在病毒感染機體時,宿主細胞通過不同的模式受體PRRs（Pattern Recognition Receptors）來識別病... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
英文摘要
縮略詞表
引言
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 實驗細胞與病毒
        1.1.2 主要儀器設(shè)備
        1.1.3 主要試劑
    1.2 實驗方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 細胞RNA提取及qRT-PCR
        1.2.3 瓊脂糖凝膠電泳實驗
        1.2.4 流感病毒三種形式RNA檢測
        1.2.5 蛋白免疫印跡Western blot
        1.2.6 免疫共沉淀實驗
        1.2.7 H7N9禽流感病毒擴增及病毒滴度TCID_(50)的測定
        1.2.8 H7N9禽流感病毒感染細胞
        1.2.9 細胞MSI2 small- interfering RNA轉(zhuǎn)染
        1.2.10 細胞MSI-2過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        1.2.11 細胞慢病毒介導的MSI2 shRNA轉(zhuǎn)染
        1.2.12 細胞siRNA/shRNA干擾后細胞活性檢測CCK-8實驗
        1.2.13 酶聯(lián)免疫吸附實驗ELISA
        1.2.14 胞核蛋白/胞漿蛋白抽提實驗
        1.2.15 激光共聚焦實驗
        1.2.16 統(tǒng)計分析
2 結(jié)果
    2.1 Musashi-2在H7N9禽流感病毒感染中的抗病毒作用
        2.1.1 H7N9禽流感病毒下調(diào)宿主蛋白Musashi-2表達
        2.1.2 Musashi-2敲減促進H7N9禽流感病毒感染
        2.1.3 Musashi-2過表達抑制H7N9禽流感病毒感染
    2.2 Musashi-2在H7N9禽流感病毒介導的固有免疫應答中的作用及分子機制研究
        2.2.1 敲減Musashi-2抑制H7N9禽流感病毒介導的相關(guān)細胞因子的表達
        2.2.2 敲減Musashi-2抑制H7N9禽流感病毒介導的IFN-β的表達
        2.2.3 過表達Musashi-2促進H7N9禽流感病毒介導的固有免疫信號通路分子激活
        2.2.4 敲減Musashi-2抑制H7N9禽流感病毒介導的IRF-3和NF-κBp65磷酸化水平
        2.2.5 Musashi-2促進轉(zhuǎn)錄因子IRF-3和NF-κB核轉(zhuǎn)移
        2.2.6 敲減Musashi-2抑制JAK-STAT信號通路激活
    2.3 Musashi-2通過阻止H7N9禽流感病毒NP蛋白核輸入抑制病毒復制
        2.3.1 Musashi-2抑制H7N9禽流感病毒的轉(zhuǎn)錄,復制作用
        2.3.2 Musashi-2抑制H7N9禽流感病毒NP蛋白核輸入
        2.3.3 Musashi-2與H7N9禽流感病毒NP蛋白在細胞內(nèi)的共定位
        2.3.4 Musashi-2與H7N9禽流感病毒NP蛋白相互作用
        2.3.5 Musashi-2抑制H7N9禽流感病毒NP核輸入
分析與討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
作者簡歷及在讀期間所取得的科研成果



本文編號：3397518