2013年,浙江省疾控中心報(bào)道了 一起由X血清群ST-7分離株引起的侵襲性腦膜炎病例。然而,在中國(guó)超過(guò)50%的侵襲性腦膜炎病是由腦膜炎奈瑟菌A血清群引起;而且,ST-7腦膜炎奈瑟菌株通常屬于A血清群。因此,我們推測(cè)該次感染是由于發(fā)生了莢膜轉(zhuǎn)換。為了確定該株腦膜炎奈瑟菌是否來(lái)源于血清群X菌和ST-7血清群A的英膜轉(zhuǎn)換,我們對(duì)X血清群ST-7株菌和3株A血清群菌ST-7的英膜基因座以及它們的側(cè)翼區(qū)域進(jìn)行了測(cè)序。通過(guò)生物信息學(xué)方法分析了英膜轉(zhuǎn)換的基因重組位點(diǎn),發(fā)現(xiàn)該ST-7株替換了來(lái)源于X血清群galE至ctrC之間大約8450 bp的DNA片段。同時(shí)我們通過(guò)莢膜重組體外實(shí)驗(yàn)測(cè)定了莢膜轉(zhuǎn)換頻率和涉及的重組基因片段的大小,結(jié)果發(fā)現(xiàn)英膜重組的頻率大約是6.3×10^-6每細(xì)菌每微克DNA,莢膜重組所涉及到的重組基因片段大小約為8.1-9.6kb。腦膜炎奈瑟菌被中性粒細(xì)胞吞噬后,中性粒細(xì)胞可以產(chǎn)生大量的活性氧族（reactive oxygen species,ROS）以影響細(xì)菌生存,同時(shí)胞內(nèi)低pH環(huán)境也不利于細(xì)菌的生長(zhǎng),但是有研究證明該菌在中性粒細(xì)胞中數(shù)量呈現(xiàn)先降低后升高的狀態(tài)... 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－３．重組Ｉ）ＮＡ片段大小對(duì)于從Ａ型至Ｘ型莢膜轉(zhuǎn)換效率的影響??（Ａ）基因組的不?

?菌制成ＯＤｆｔＣＫ）?〇．１的細(xì)菌懸液，先加入抑菌型抗生素，半小時(shí)后加入殺菌型抗生素，??經(jīng)過(guò)一段時(shí)間３７?°Ｃ搖菌培養(yǎng)后（李斯特菌為６０?ｍｉｎ，腦膜炎奈瑟菌為９０?ｍｉｎ），??梯度稀釋涂布到無(wú)抗性平板，然后挑選單克隆，分別涂到抗性板和無(wú)抗性平板確??定敏感克隆的比例，比較經(jīng)過(guò)富集實(shí)驗(yàn)和沒(méi)有經(jīng)過(guò)富集實(shí)驗(yàn)的敏感菌的得率，確??定富集效果。最終基因是否敲除通過(guò)菌落ＰＣＲ和測(cè)序來(lái)確定。??３結(jié)果與討論??３．１殺菌型抗生素的殺菌活性??使用三種氨基糖苷類(lèi)抗生素驗(yàn)證其對(duì)李斯特菌和腦膜炎奈瑟菌的殺菌效率，??發(fā)現(xiàn)這些抗生素的不同濃度均對(duì)李斯特菌和腦膜炎奈瑟菌有殺菌作用，且殺菌效??果與藥物濃度呈正相關(guān)。??

?Ｔｉｍｅ?（ｍｉｎ）?Ｔｉｍｅ?（ｍｉｎ）??圖４－１氨基糖苷類(lèi)抗生素的殺菌活性??使用三種氨基糖苷類(lèi)抗生素，卡那霉素（Ｋａｎ），鏈霉素（Ｓｔｒｅｐ）和慶大霉素（Ｇｅｎ）以及它們的三??種不同濃度（５０ｍｇ／Ｌ，?１００ｍｇ／Ｌ，２５０ｍｇ／Ｌ）驗(yàn)證其對(duì)腦膜炎奈瑟菌（Ａ）以及李斯特菌（Ｂ）的殺菌作??用。??４６??


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