目的建立斑點(diǎn)熱群立克次體（SFGR）TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）快速檢測方法。方法根據(jù)日本斑點(diǎn)熱立克次體外膜蛋白A（ompA）基因序列設(shè)計(jì)特異性引物和探針,建立基于TaqMan探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法,對(duì)其特異性、靈敏性、重復(fù)性進(jìn)行檢測,用建立的此檢測方法和常規(guī)的巢式PCR方法同時(shí)對(duì)臨床收集的80份患者血標(biāo)本進(jìn)行檢測并比較兩者結(jié)果。結(jié)果成功建立了檢測SFGR的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線的循環(huán)閾值與模板拷貝數(shù)均呈良好的線性關(guān)系（r>0.99）,且在檢測SFGR核酸樣本時(shí)具有良好的靈敏度、特異性和重復(fù)性。結(jié)論該研究建立了基于TaqMan探針檢測SFGR的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法,為臨床實(shí)驗(yàn)室快速確診SFGR疾病提供了快速、有效的技術(shù)手段。 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,55(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

ompA基因TaqMan qPCR敏感性結(jié)果

建立的qPCR方法對(duì)質(zhì)粒含量為1.9×103、1.9×102、1.9×101、1.9×100和1.9×10-1拷貝有陽性擴(kuò)增信號(hào),對(duì)1.9×100、1.9×10-1拷貝均未檢測到擴(kuò)增信號(hào),表明本研究建立的方法的最低檢測限為19拷貝。見圖4。圖2 ompA基因TaqMan qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線

ompA基因TaqMan qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2972772