【摘要】：本文旨在對發(fā)熱伴血小板減少綜合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)患者中和抗體進行定性和效價評估,建立中和抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)。用96孔微量培養(yǎng)板培養(yǎng)非洲綠猴腎細胞(Vero-E6)并接種發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV),以抗核衣殼蛋白(nucleocapsid protein,NP)單克隆抗體為一抗,使用間接ELISA檢測SFTSV NP,根據(jù)光密度(optical density,OD)判斷陽性孔數(shù),采用ReedMuench方法計算病毒半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量(50%tissue culture infective dose,TCID_(50)),以反映SFTSV在Vero-E6細胞中的復制水平。ELISA檢測中和抗體作用后的病毒殘余量,可間接反映中和抗體的作用效果并進行定量。應用以上建立的微量中和-ELISA對10例SFTS患者的雙份血清進行中和抗體效價測定,8例患者恢復期血清效價較急性期增高4倍以上,7份患者恢復期血清效價達1∶1 280,急性期血清效價最高為1∶640。結果提示,本研究建立的ELISA操作簡便,結果判定客觀,所需時間短,可用于臨床血清抗體診斷,也可用于血清流行病學調查和疫苗效果臨床評價等。

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