【摘要】：背景：結(jié)核病是主要的公共健康問(wèn)題,每年有1000萬(wàn)新病例被診斷為結(jié)核病,造成200萬(wàn)受害者的死亡代價(jià)。然而,據(jù)估計(jì)在最初已經(jīng)感染了結(jié)核分枝桿菌的20億人中,只有5%到10%進(jìn)展成為有癥狀的結(jié)核病。為什么有一些感染的個(gè)體進(jìn)展成為活動(dòng)性的疾病而其他人卻沒(méi)有,具體原因至今仍然不完全清楚。結(jié)核病在不同人種、種族和家族中以不同的比率發(fā)生表明了遺傳素質(zhì)對(duì)結(jié)核易感性可能有重要作用。結(jié)核分枝桿菌與環(huán)境和宿主遺傳因素復(fù)雜的交互作用在結(jié)核病發(fā)展中扮演著關(guān)鍵性的作用。宿主遺傳因素至少部分解釋了為什么一些人對(duì)感染更敏感或不敏感。結(jié)核易感基因在結(jié)核病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要作用。已知功能研究和作用機(jī)制比較明確的宿主基因有自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白1(natural resistance associated macrophage protein1, NRAMP1)基因、維生素D受體(vitamin D receptor, VDR)基因、]HLA(human leukocyte antigen, HLA)-DRB1和HLA-DQB1基因等,結(jié)核病發(fā)生發(fā)展與這些基因某些位點(diǎn)多態(tài)性有關(guān)聯(lián),國(guó)內(nèi)外多個(gè)研究團(tuán)隊(duì)對(duì)于基因多態(tài)性與結(jié)核病易感性的相關(guān)性開(kāi)展了大量研究,然而研究結(jié)果在不同的人種和種族并不一致,有的結(jié)果甚至截然相反,顯示出這些宿主基因多態(tài)性與結(jié)核病易感性之間的種族差異性,因此本研究主要探討結(jié)核易感基因與新疆哈薩克族結(jié)核病之間的關(guān)聯(lián)。 目的：研究NRAMP1基因的3’端非編碼區(qū)(3'untranslated region,3'UTR)、VDR基因(Fokl、TaqI位點(diǎn))、HLA-DRB1和HLA-DQB1基因多態(tài)性與哈族人群結(jié)核病易感性是否相關(guān)。 方法：采用病例-對(duì)照研究的思路設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。對(duì)于NRAMP1基因3’UTR位點(diǎn),VDR基因兩個(gè)多態(tài)性(FokI、TaqI)位點(diǎn)進(jìn)行基因分型選擇聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)分析的方法；而對(duì)于HLA-DRB1和HLA-DQB1基因進(jìn)行基因分型則采用聚合酶鏈反應(yīng)-序列特異性引物(Polymerase chain reaction-sequence specific primers, PCR-SSP)分析的方法。采用x2檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)方法分析NRAMP1基因3'UTR、VDR基因(FokI、TaqI位點(diǎn))及HLA-DRB1和HLA-DQB1基因多態(tài)性與哈族結(jié)核病易感性的關(guān)系。 結(jié)果：1.NRAMP1基因3’UTR位點(diǎn)多態(tài)性在病例組與對(duì)照組問(wèn)的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002, OR=1.859,95%CI=1.182-2.926). NRAMPI基因3'UTR位點(diǎn)的TGTG-頻率在病例組高于對(duì)照組,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。2. VDR基因FokI位點(diǎn)多態(tài)性在病例組與對(duì)照組間的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,OR=1.530,95%CI=1.007-2.325)。VDR基因TaqI位點(diǎn)多態(tài)性在病例組與對(duì)照組間的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。VDR基因FokI位點(diǎn)的f等位基因頻率在病例組和對(duì)照組中的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)；而VDR基因TaqI位點(diǎn)的t等位基因頻率在病例組低于對(duì)照組,組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.260)。3.病例組HLA-DRB1*04和HLA-DQB1*0201等位基因頻率明顯高于對(duì)照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.011and0.002, OR=1.889and1.802,95%CI=1.153-3.095and1.230-2.639)。 結(jié)論：在新疆哈薩克族人群中,NRAMPI基因3'UTR位點(diǎn)多態(tài)性可能與結(jié)核病易感性有關(guān)聯(lián),攜帶TGTG-等位基因增加了患結(jié)核病的風(fēng)險(xiǎn)；VDR基因的FokI位點(diǎn)多態(tài)性可能與結(jié)核病易感性相關(guān),攜帶f等位基因增加了該人群患結(jié)核病的風(fēng)險(xiǎn)；TaqI位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)核病易感性不相關(guān)；VDR基因這兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)之間不存在連鎖不平衡；攜帶HLA-DRB1*04和HLA-DQB1*0201等位基因增加了該人群患結(jié)核病的風(fēng)險(xiǎn)。
【圖文】：

華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文結(jié)果基因多態(tài)性憸切分析結(jié)果.1 NRAMP1基因3’ UTR位點(diǎn)多態(tài)性酶切分析結(jié)果研究人群中發(fā)現(xiàn)NRAMP1基因3’UTR位點(diǎn)存在三種基因型:TGTG-/-、TGTG+/-、GTG+/+0用限制性?xún)?nèi)切酶Fokl消化PCR產(chǎn)物，結(jié)果顯示：如果TGTG缺失則不存Fokl酶切位點(diǎn)，PCR產(chǎn)物被酶切后電泳出現(xiàn)240bp—個(gè)片段；而TGTG無(wú)缺失則存在Fokl酶切位點(diǎn)，，PCR產(chǎn)物被酶切后電泳出現(xiàn)211bp和33bp兩個(gè)片段。雜合基因則產(chǎn)生240bp，211bp和33bp三個(gè)片段。酶切結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖2 VDR基因（Fokl) PCR產(chǎn)物的酶切電泳圖M;DNA marker； 1： ff 型；2，4: FF 型；3: Ff 型DR基因TaqI位點(diǎn)多態(tài)性憸切分析結(jié)果研宄人群中發(fā)現(xiàn)VDR基因TaqI位點(diǎn)存在三種基因型：TT、Tt、tt。用限制性TaqI消化PCR產(chǎn)物,結(jié)果顯示:如果TaqI位點(diǎn)的T/C單核苷酸位點(diǎn)處是C,TaqI酶切位點(diǎn)，PCR產(chǎn)物被酶切后電泳形成290bp及165bp兩個(gè)片段；如果核苷酸處是T,則沒(méi)有TaqI酶切位點(diǎn)，PCR產(chǎn)物被酶切后電泳形成455bp段。雜合基因型則產(chǎn)生455bp，290bp及165bp三個(gè)片段。酶切結(jié)果見(jiàn)圖3。SOO bp > 'C ASS 1>P
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R52

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王春梅,李輝,曹峰林;HLA—Ⅲ類(lèi)基因多態(tài)性與漢族肺結(jié)核病易感性關(guān)系的研究[J];哈爾濱醫(yī)藥;1999年01期

2 劉麗紅,孫晶,施秀琴,曹峰林;HLA與結(jié)核病相關(guān)性研究[J];哈爾濱醫(yī)藥;2001年01期

3 陳雪融;馮玉麟;馬s

本文編號(hào)：2579581