【摘要】：目的發(fā)現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌Fts Z的特異性抑制劑,為開發(fā)針對該靶點的新型抗結(jié)核化合物奠定基礎(chǔ)。方法克隆和表達結(jié)核分枝桿菌Fts Z蛋白并優(yōu)化其酶活測活方法,構(gòu)建Fts Z抑制劑的高通量篩選模型;對化合物庫中2萬個化合物進行篩選,將篩選得到的抑制劑212H進行IC50以及分子水平活性測定;用菌液稀釋法評價212H對結(jié)核標(biāo)準(zhǔn)株、臨床分離株以及耐藥株的抗結(jié)核活性。結(jié)果得到了較純的結(jié)核分枝桿菌Fts Z蛋白,建立并優(yōu)化了Fts Z酶活測定體系以及其抑制劑的高通量篩選模型,篩選得到1個具有較高抑制率的抑制劑212H,該抑制劑具有顯著的體外抗結(jié)核活性。結(jié)論建立了穩(wěn)定的結(jié)核分枝桿菌Fts Z抑制劑的高通量篩選模型,應(yīng)用該模型篩選得到的抑制劑具有抗結(jié)核活性。
[Abstract]:Aim to identify specific inhibitors of Mycobacterium tuberculosis Fts Z, and to lay a foundation for the development of new antituberculosis compounds targeting the target. Methods the Fts Z protein of Mycobacterium tuberculosis was cloned and expressed, and the enzyme activity assay was optimized. The high throughput screening model of Fts Z inhibitor was constructed. A total of 20 000 compounds in the compound library were screened. The IC50 and molecular level activity of the selected inhibitor 212H were determined, and the antituberculous activity of 212H against tuberculosis standard strains, clinical isolates and drug-resistant strains was evaluated by bacterial dilution method. Results the purified Fts Z protein of Mycobacterium tuberculosis was obtained. The enzyme activity assay system of Fts Z and the high throughput screening model of its inhibitors were established and optimized, and a inhibitor with high inhibition rate of 212H was obtained. The inhibitor has significant anti-tuberculosis activity in vitro. Conclusion A high throughput screening model for stable Fts Z inhibitors of Mycobacterium tuberculosis was established, and the inhibitors obtained by this model had antituberculous activity. [WT5 "HZ] conclusion [WT5" BZ]
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所天然藥物活性物質(zhì)與功能國家重點實驗室;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所國家新藥(微生物)篩選實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81302816,81321004)
【分類號】：R52

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：2448665