【摘要】：目的探討慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者肝組織HBVcccDNA與血清HBV DNA及其標志物等之間的相關(guān)性。 方法采用實時定量熒光PCR檢測法檢測10例CHB患者肝組織HBVcccDNA，用PCR-熒光探針法檢測血清HBV DNA含量，用電化學發(fā)光免疫分析法定量檢測乙肝標志物，常規(guī)病理學染色分析病理學改變，對肝組織進行炎癥活動度分級(G)及纖維化程度分期(S)。 結(jié)果①10例CHB患者肝組織病理結(jié)果：G2S1：3例；G2S2：2例；G2S3：1例；G3S2：2例；G3S3：2例。②10例CHB患者肝組織均檢測到HBVcccDNA，定量值為1.80x104拷貝/mL～8.50x109拷貝/mL。10例CHB患者血清HBVDNA:陽性8例，定量值為2.23xlO5拷貝/mL～3.08xlO8拷貝/mL；陰性2例(低于檢測下限103拷貝/mL)。③肝組織HBVcccDNA定量值與肝組織炎癥活動度(G)及纖維化程度(S)無相關(guān)性（Ｐ0.05）。④肝組織HBVcccDNA定量值與血清HBV DNA定量值成高度正相關(guān)（ｒ=0.898，Ｐ0.01）。⑤肝組織HBVcccDNA定量值與血清HBeAg滴度呈高度正相關(guān)性(r=0.821, Ｐ0.01)，與血清HBsAg滴度無相關(guān)性(r=-0.483, Ｐ0.05）。⑥肝組織HBVcccDNA定量值與ALT、AST定量水平均無相關(guān)性。⑦血清HBV DNA與HBsAg、HBeAg、ALT及AST在統(tǒng)計學上，均無相關(guān)性（0.05）。 結(jié)論肝組織HBVcccDNA定量值與血清HBV DNA定量值和HBeAg滴度呈高度正相關(guān)，均能夠直接反映CHB患者體內(nèi)HBV的存在和復制狀態(tài)；但其定量值的高低與肝組織病理結(jié)果、HBsAg滴度、ALT、AST水平均無相關(guān)。肝組織HBVcccDNA定量檢測聯(lián)合血清HBVDNA和HBeAg是判斷抗病毒治療療效的可靠指標。 目的探討慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者血清HBVcccDNA與血清HBV DNA及其標志物等之間的相關(guān)性。 方法采用實時定量熒光PCR檢測法檢測10例CHB患者血清HBVcccDNA，用PCR-熒光探針法檢測血清HBV DNA含量，用電化學發(fā)光免疫分析法定量檢測乙肝標志物。 結(jié)果①10例CHB患者血清中檢測到HBVcccDNA有6例，定量值為4.68x103拷貝/mL～1.08x107拷貝/mL，，未檢測到者4例(低于檢測下限103拷貝/mL)。②10例CHB患者血清HBV DNA陽性10例，定量值為3.51xlO5拷貝/mL～6.29xlO8拷貝/mL。③CHB血清HBVcccDNA定量值與血清HBV DNA定量值、血清HBeAg滴度、血清HBsAg滴度均沒有顯著性的相關(guān)性（ｒ=0.049，Ｐ0.05；r=0.302,0.05；r=-0.248, Ｐ0.05）。④血清HBVcccDNA定量值與ALT、AST水平均無相關(guān)性(Ｐ0.05）。 結(jié)論血清HBVcccDNA水平與血清HBVDNA水平、血清HBSAg和ＨＢeＡｇ的滴度以及ALT、AST均無相關(guān)。由此可見檢測血清HBVcccDNA的定量并不能全面的反應血中HBV的復制和感染。所以不能成為血清HBVDNA及乙肝血清標志物的替代指標。 目的探討慢性乙型病毒性肝炎（CHB）在未進行抗病毒之前檢測患者P-S區(qū)基因變異。 方法采用實時定量熒光PCR檢測法檢測P-S區(qū)基因變異。 結(jié)果10例CHB患者血清均未檢測到P-S區(qū)基因變異。 結(jié)論本研究沒有檢測到慢乙肝患者在接受抗病毒之前發(fā)生基因突變導致的原發(fā)性耐藥，因此仍需要以后的研究實驗進一步證實。
[Abstract]:Objective to investigate the relationship between HBVcccDNA in liver tissue and serum HBV DNA and its markers in patients with chronic hepatitis B (CHB). Methods Hepatic HBV cccDNAs were detected by real-time quantitative PCR assay, serum HBV DNA levels were detected by PCR-fluorescence probe method, HBV markers were quantitatively detected by electrochemiluminescence immunoassay, pathological changes were analyzed by routine pathological staining. Grade of inflammation activity (G) and stage of fibrosis (S). For liver tissue Results the histopathological findings of liver tissue of 110 CHB patients were as follows: 1 case of G2S2: 1 case of G3S2: 1 case of G2S2: 1 case of G2S2 HBV cccDNAwas detected in liver tissue of 210 CHB patients with G3S3:2. The quantitative value was 1.80x104 copy / mLX 8.50x109 / mL.10. The serum HBV DNA was positive in 8 cases and 2.23xlO5 copy / mLX 3.08xlO8 copy / mLL in the serum of CHB patients. There was no significant correlation between the quantitative value of liver tissue HBVcccDNA and the degree of hepatic inflammation (G) and fibrosis (S) (P0.05). There was a high positive correlation between the quantitative value of liver tissue HBVcccDNA and serum HBV DNA (P0.05). The quantitative value of HBVcccDNA in liver tissue was positively correlated with the titer of serum HBeAg (r = 0.821, P 0.01), but not correlated with the titer of serum HBsAg (r-0.483, P0.05) .6 there was no correlation between the quantitative value of HBVcccDNA in liver tissue and the quantitative level of alt. 7. There was no statistical correlation between serum HBV DNA and HBHBeAgALT and AST. There was no correlation (0.05). Conclusion there is a highly positive correlation between the quantitative value of HBVcccDNA in liver tissue and the serum HBV DNA and HBeAg titer, which can directly reflect the existence and replication of HBV in patients with CHB, but there is no correlation between the quantitative value of CHB and the level of serum HBV DNA titer and alt level in patients with CHB. The quantitative detection of liver tissue HBVcccDNA combined with serum HBVDNA and HBeAg is a reliable index for evaluating the efficacy of antiviral therapy. Objective to investigate the relationship between serum HBVcccDNA, serum HBV DNA and its markers in patients with chronic hepatitis B (CHB). Methods Serum HBV cccDNAs in 10 patients with CHB were detected by real-time quantitative fluorescence PCR assay, serum HBV DNA levels were detected by PCR-fluorescence probe method, and HBV markers were quantitatively detected by electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA). Results there were 6 cases of HBVcccDNA detected in the serum of 110 patients with CHB. The quantitative value was 1.08x107 copies / mLof 4.68x103 copy. 4 cases (below the detection limit of 103copies / mL) and 10 cases of CHB patients were positive for HBV DNA in the serum of 4 cases (below the detection limit of 103copies / mL). There was no significant correlation between the quantitative value of serum HBVcccDNA and serum HBV DNA, the titer of serum HBeAg and the titer of serum HBsAg (r 0.049%, P 0.05 P 0.05 0. 302 鹵0. 05). There was no correlation between serum HBVcccDNA and alt level (P0.05). Conclusion there is no correlation between serum HBVcccDNA level and serum HBVDNA level, serum HBSAg and HBeAg titers and alt AST. It can be seen that the detection of serum HBVcccDNA does not fully respond to the replication and infection of HBV in the blood. So it can not be a substitute index of serum HBVDNA and hepatitis B serum marker. Objective to investigate the gene variation of P-S region in patients with chronic viral hepatitis B (CHB) before antiviral detection by (CHB). Methods A real-time quantitative PCR assay was used to detect the gene variation of P-S region. Results No P-S gene mutation was detected in serum of 10 patients with CHB. Conclusion this study did not detect the primary drug resistance caused by gene mutation in patients with chronic hepatitis B before receiving antiviral therapy.
【學位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R512.62

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本文編號：2196384