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植入物界面結(jié)核分枝桿菌生物膜形成的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-08-19 09:16
【摘要】:【目的】研究不同植入物界面結(jié)核分枝桿菌的粘附能力及生物膜形成情況,同時(shí)觀察抗結(jié)核藥物利福平對結(jié)核分枝桿菌粘附能力及生物膜的影響,以及骨結(jié)核病灶內(nèi)結(jié)核分枝桿菌在植入物界面形成生物被膜的情況,探討一期內(nèi)固定或關(guān)節(jié)成行技術(shù)治療活動(dòng)性骨與關(guān)節(jié)結(jié)核的可行性和安全性,為內(nèi)固定術(shù)或人工關(guān)節(jié)成行術(shù)治療活動(dòng)性骨結(jié)核安全可靠的原因提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)理論依據(jù)!痉椒ā繉⑩伜辖、鈷鉻鉬合金、聚乙烯三種材料的植入物在無菌條件下分別置于用Middlebrook 7H9液體培養(yǎng)基制備的結(jié)核分枝桿菌懸浮液中,共同培養(yǎng)4周后,隨機(jī)取出1塊,再加入利福平溶液繼續(xù)培養(yǎng)2周。樣品經(jīng)固定、干燥、噴金后,運(yùn)用電子顯微鏡觀察,并計(jì)數(shù)植入物界面單位面積粘附菌落數(shù),比較結(jié)核分枝桿菌對不同植入物(鈦合金、鈷鉻鉬合金、聚乙烯)、界面(光滑面、粗糙面)的粘附能力,并觀察利福平干預(yù)前后植入物界面生物膜結(jié)構(gòu)。收集骨結(jié)核內(nèi)固定術(shù)后復(fù)發(fā)患者再次手術(shù)時(shí)取出的內(nèi)置物,經(jīng)固定、干燥、噴金后,采用掃描電子顯微鏡觀察取出內(nèi)固定物界面結(jié)核生物被膜的形成情況!窘Y(jié)果】利福平干預(yù)前,聚乙烯界面黏附的菌落數(shù)顯著多于鈷鉻鉬界面,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);鈷鉻鉬材料界面黏附的菌落數(shù)與鈦合金材料界面相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);利福平干預(yù)后,三種植入物界面黏附菌落數(shù)均顯著減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。植入物界面粗糙度不同,結(jié)核分枝桿菌的粘附能力不同,更容易黏附于植入物的粗糙界面。植入物界面與材料屬性之間具有一階交互作用(P0.05)。結(jié)核分枝桿菌在鈦合金、鈷鉻鉬材料界面未見生物膜形成;在聚乙烯界面能見典型的生物膜形成,但利福平干預(yù)能抑制,甚至破壞結(jié)核生物膜。從骨結(jié)核病灶內(nèi)取出的植入物界面僅見散在結(jié)核分枝桿菌粘附,或是干癟或是裂解,未見結(jié)核生物膜形成。【結(jié)論】結(jié)核分支桿菌對植入物的粘附能力與植入物的材料屬性、界面狀態(tài)有關(guān),可在植入物界面形成生物膜,但具有選擇性和特異性。利福平干預(yù)能降低結(jié)核分支桿菌粘附植入物界面的能力,而且能抑制,甚至破壞結(jié)核生物膜。骨結(jié)核病灶內(nèi),未見結(jié)核分枝桿菌在植入物鈦合金、鈷鉻鉬材料的界面形成生物膜。結(jié)核分支桿菌對植入物界面的低粘附力、極少形成生物膜是活動(dòng)性骨關(guān)節(jié)結(jié)核一期病灶清除內(nèi)固定或關(guān)節(jié)成行技術(shù)安全可行的緊要因素。在全身和局部使用抗結(jié)核藥物的前提下,選擇性應(yīng)用假體植入結(jié)核病灶,不會(huì)增加骨結(jié)核術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。
[Abstract]:[objective] to study the adhesion ability and biofilm formation of Mycobacterium tuberculosis at the interface of different implants, and to observe the effect of rifampicin on the adhesion ability and biofilm of Mycobacterium tuberculosis. And the formation of biofilm of Mycobacterium tuberculosis in bone tuberculosis lesions at the implant interface, and to explore the feasibility and safety of one-stage internal fixation or joint formation technique in the treatment of active bone and joint tuberculosis. To provide a solid theoretical basis for the safe and reliable treatment of active bone tuberculosis by internal fixation or artificial articulation. [methods] Titanium alloy, cobalt-chromium-molybdenum alloy, The implants of three kinds of polyethylene materials were placed in the suspension of Mycobacterium tuberculosis prepared by Middlebrook 7H9 liquid medium in aseptic condition. After 4 weeks of co-culture, one piece was taken out at random, and then added rifampicin solution for 2 weeks. After fixing, drying and spraying gold, the samples were observed by electron microscope, and the number of colony adhesion per unit area of implant interface was counted. The effect of Mycobacterium tuberculosis on different implants (titanium alloy, cobalt-chromium-molybdenum alloy, polyethylene) and interface (smooth surface) were compared. The adhesiveness of rifampicin was observed before and after the intervention of rifampicin, and the biofilm structure of implant interface was observed. To collect the internal objects taken out by the patients with recurrent bone tuberculosis after reoperation, after fixation, drying, and spraying gold, The formation of biofilm was observed by scanning electron microscope. [results] before the intervention of rifampicin, the number of colonies adhered to the interface of polyethylene was significantly higher than that of the interface of cobalt, chromium and molybdenum. There was significant difference (P0.05); there was no significant difference in colony number between cobalt, chromium-molybdenum interfacial adhesion and titanium alloy interface (P0.05); after rifampicin intervention, the number of colonies at the interface of the three implants decreased significantly. The difference was statistically significant. The interface roughness of implants is different, and the adhesion ability of Mycobacterium tuberculosis is different, so it is easier to adhere to the rough interface of implants. There was a first order interaction between implant interface and material properties (P0.05). Mycobacterium tuberculosis did not form biofilm at the interface of cobalt, chromium and molybdenum, but typical biofilm formation could be seen at the interface of polyethylene, but rifampicin could inhibit or even destroy the biofilm. The interface of the implants extracted from the bone tuberculosis lesions was only scattered in the adhesion of Mycobacterium tuberculosis, either dried or cracked, and no biofilm formation was observed. [conclusion] the adhesion ability of Mycobacterium tuberculosis to the implants and the material properties of the implants were observed. The biofilm can be formed at the implant interface, but it is selective and specific. Rifampicin can reduce the ability of mycobacterium tuberculosis to adhere to the implant interface, and can inhibit or even destroy TB biofilm. In the focus of bone tuberculosis, no mycobacterium tuberculosis formed biofilm at the interface of the implanted titanium alloy and cobalt chromium-molybdenum material. The low adhesion of Mycobacterium tuberculosis to the implant interface and the rare formation of biofilm are the key factors for the primary debridement and internal fixation of active bone joint tuberculosis or for the safety and feasibility of joint formation. Under the premise of systemic and local use of antituberculous drugs, selective implant implantation of tuberculosis does not increase the risk of postoperative recurrence of bone tuberculosis.
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R687;R529.2

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本文編號:2191219

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