本文關(guān)鍵詞：巨噬細(xì)胞極化改變?cè)诮Y(jié)核分枝桿菌感染及結(jié)核性肉芽腫形成和發(fā)展過(guò)程中的作用及其調(diào)控機(jī)制研究　出處：《南昌大學(xué)》2013年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 結(jié)核分枝桿菌 結(jié)核性肉芽腫 巨噬細(xì)胞極化 泡沫巨噬細(xì)胞 氧化應(yīng)激

【摘要】：結(jié)核病(TB)是由結(jié)核分枝桿菌(Mtb)感染引起的慢性感染性疾病,同時(shí)也是一種免疫紊亂性疾病。目前的研究提示結(jié)核性肉芽腫在TB的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸過(guò)程中扮演了雙重角色。作為T(mén)B免疫的起始細(xì)胞和主要效應(yīng)細(xì)胞,巨噬細(xì)胞始終參與了Mtb感染及肉芽腫形成、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的全過(guò)程。巨噬細(xì)胞是一種高度可塑的復(fù)雜群體,在不同的微環(huán)境下,巨噬細(xì)胞可發(fā)生表型和功能極化從而呈現(xiàn)出不同的功能。為了進(jìn)一步探討不同類(lèi)型巨噬細(xì)胞在Mtb感染過(guò)程中的作用,闡明結(jié)核性肉芽腫形成和發(fā)展過(guò)程中巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)及其可能的調(diào)控機(jī)制,本研究進(jìn)行了以下四部分的探討：1不同極化狀態(tài)巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)、表型鑒定及其對(duì)Mtb的殺傷作用我們首先以人單核細(xì)胞來(lái)源的巨噬細(xì)胞(MDM)作為研究對(duì)象,采用IFN-γ+LPS作為M1型巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)劑,IL-4作為M2型巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)劑,在體外對(duì)MDM進(jìn)行了極化誘導(dǎo),并對(duì)誘導(dǎo)后M1和M2型巨噬細(xì)胞的分子表型及細(xì)胞因子分泌情況進(jìn)行了鑒定。以未處理的MDM作為對(duì)照,我們對(duì)體外誘導(dǎo)的不同類(lèi)型的巨噬細(xì)胞用Real-Time PCR檢測(cè)了CXCL10、CXCL11、CCR7,CCL17和CCLl8基因的表達(dá)；用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)了巨噬細(xì)胞上HLA-DR、CD86,CD163(清道夫受體)和CD206(甘露糖受體)的表達(dá)；用ELISA檢測(cè)了細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α、IFN-γ和CCL18的含量。綜合分析巨噬細(xì)胞的表面活性標(biāo)志的表達(dá)特征和細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果,表明我們?cè)隗w外成功地用IFN-γ+LPS誘導(dǎo)了M1型巨噬細(xì)胞,用IL-4誘導(dǎo)了M2型巨噬細(xì)胞。在此基礎(chǔ)上,我們進(jìn)一步比較了Mtb感染對(duì)巨噬細(xì)胞極化表型的影響,以及不同極化狀態(tài)的巨噬細(xì)胞對(duì)Mtb的殺傷作用。研究發(fā)現(xiàn)Mtb感染后可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞形成M1/M2混合表型；與未處理對(duì)照比較,M1型巨噬細(xì)胞對(duì)Mtb的殺傷功能顯著增強(qiáng),而M2型巨噬細(xì)胞的殺菌功能則受到明顯抑制。本部分研究首次揭示了Mtb感染后巨噬細(xì)胞的活化類(lèi)型及不同類(lèi)型巨噬細(xì)胞在Mtb感染過(guò)程中的作用。2人結(jié)核性肉芽腫巨噬細(xì)胞的表型鑒定在本研究中,我們采用免疫組化染色對(duì)人肺結(jié)核性肉芽腫組織進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)有大量的活化巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),M1型巨噬細(xì)胞的活化標(biāo)志誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型巨噬細(xì)胞的表面標(biāo)志物CD206在肉芽腫巨噬細(xì)胞均有表達(dá)。Real-Time PCR檢測(cè)顯示,與對(duì)照組織相比,M1型巨噬細(xì)胞相關(guān)基因CXCL10和CXCL11,M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)基因CCL17和CCL18在結(jié)核性肉芽腫組織中均表達(dá)上調(diào)。本部分的研究結(jié)果提示人肺結(jié)核性肉芽腫中有M1/M2混合型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),這些極化的巨噬細(xì)胞在Mtb感染過(guò)程中扮演重要角色。3結(jié)核性肉芽腫形成和發(fā)展不同階段的巨噬細(xì)胞極化表型和功能改變研究在本研究中,我們通過(guò)Mtb感染人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),成功構(gòu)建人結(jié)核性肉芽腫體外模型,發(fā)現(xiàn)在肉芽腫內(nèi)有大量活化的巨噬細(xì)胞聚集。硝基四氮唑藍(lán)(NBT)還原試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示,Mtb感染可以增強(qiáng)肉芽腫巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)功能,誘導(dǎo)肉芽腫巨噬細(xì)胞活化。通過(guò)對(duì)巨噬細(xì)胞極化標(biāo)志物及培養(yǎng)上清液細(xì)胞因子水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在Mtb感染早期肉芽腫巨噬細(xì)胞活化為具有殺菌功能的M1型巨噬細(xì)胞,隨著感染時(shí)間的延長(zhǎng),巨噬細(xì)胞逐漸向M2型改變。這些研究結(jié)果揭示了結(jié)核性肉芽腫形成和發(fā)展過(guò)程中巨噬細(xì)胞的活化類(lèi)型及功能變化。4巨噬細(xì)胞的極化類(lèi)型及氧化還原狀態(tài)對(duì)肉芽腫形成和發(fā)展的影響及意義在本研究中,我們?cè)诮Y(jié)核性肉芽腫體外模型構(gòu)建前,分別將巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)分化為M1和M2型。研究發(fā)現(xiàn),誘導(dǎo)的M1型巨噬細(xì)胞有利于肉芽腫組織對(duì)結(jié)核菌的殺傷,促進(jìn)肉芽腫的形成。油紅O染色發(fā)現(xiàn),在Mtb感染過(guò)程中肉芽腫巨噬細(xì)胞發(fā)生泡沫化改變,M2型巨噬細(xì)胞可顯著促進(jìn)泡沫巨噬細(xì)胞的形成,從而導(dǎo)致Mtb在細(xì)胞內(nèi)潛伏感染。此外,我們還發(fā)現(xiàn)Mtb感染后肉芽腫巨噬細(xì)胞還原型谷胱甘肽(GSH)水平逐漸降低,促進(jìn)肉芽腫呈氧化應(yīng)激狀態(tài)�？寡趸瘎㎞-乙酰半胱氨酸(NAC)可以顯著糾正細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞對(duì)Mtb的殺菌活性,有利于控制結(jié)核菌感染。研究結(jié)果提供了一種未來(lái)TB臨床治療的可能性方案,即通過(guò)誘導(dǎo)M1型巨噬細(xì)胞從而控制Mtb潛伏感染的新治療策略,為結(jié)核肉芽腫組織因氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞殺菌活性減低提供新的靶點(diǎn)和研究思路。
[Abstract]:In order to further study the role of macrophages in the pathogenesis of Mtb infection , the expression of IL - 6 , IL - 10 , IL - 12 , TNF - 偽 , IFN - 緯 , and IL - 12 in macrophages were investigated . In this study , it was found that Mtb infection could enhance the activity of macrophages and promote the formation of granulomas .

【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R52

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 付愛(ài)坤;胡勝蘭;杜威;史艷云;李衛(wèi)芬;;益生菌對(duì)巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用[J];動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2013年12期

2 鄭得亮;毛偉征;馬貴亮;;IKKβ-RNAi腺病毒構(gòu)建及其HEK293T細(xì)胞表達(dá)[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年01期

3 雷宇鵬;曾振國(guó);胡德泉;;白藜蘆醇對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞極化改變的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2015年19期

4 朱錫群;易偉;熊曉星;簡(jiǎn)志宏;;巨噬細(xì)胞和缺血性腦卒中[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2015年04期

5 張彤;唐興奎;梁偉雄;蔡育志;李林;何嘉琳;陳豫欽;;網(wǎng)/腹膜乳斑的巨噬細(xì)胞表型與結(jié)直腸癌分期的關(guān)系[J];嶺南現(xiàn)代臨床外科;2014年01期

6 胡吉夢(mèng);姜昊文;;免疫相關(guān)因素在膀胱癌發(fā)病機(jī)制與免疫治療中的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2015年07期

7 曹春雨;王清;王艷林;;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞極化的研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2013年11期

8 周冰冰;李玉潔;李琦;楊慶;翁小剛;陳穎;王婭杰;郭琰;劉栩岑;鞏仔鵬;闞曉溪;張瑞杰;朱曉新;;巨噬細(xì)胞極化及其在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用[J];世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化;2014年05期

9 侯作旭;張圓;高峰;;有氧運(yùn)動(dòng)的心血管保護(hù)機(jī)制及其研究進(jìn)展[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2014年04期

10 劉慶淮;袁冬青;;年齡相關(guān)性黃斑變性發(fā)病機(jī)制新進(jìn)展[J];實(shí)用老年醫(yī)學(xué);2014年10期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 羅曉;不同來(lái)源細(xì)胞外基質(zhì)外科補(bǔ)片的生物學(xué)性質(zhì)研究[D];華中科技大學(xué);2013年

2 羅悅晨;電壓門(mén)控型鈉通道中介的單核/巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)在心肌缺血再灌注損傷中的作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

3 蘆琳琳;紅景天苷的抗衰老作用：口服紅景天苷改善老齡大鼠免疫反應(yīng)和增強(qiáng)谷氨酰半胱氨酸連接酶活性[D];中國(guó)海洋大學(xué);2013年

4 原江水;白藜蘆醇對(duì)大鼠的抗衰老作用研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2013年

5 張欲凱;枸杞多糖對(duì)大鼠脊髓夾傷作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

6 戴菱菱;巨噬細(xì)胞的替代激活抑制脂毒性引起的巨噬細(xì)胞死亡[D];中南大學(xué);2013年

7 歷志;Notch信號(hào)調(diào)控巨噬細(xì)胞參與心梗重塑的作用和分子機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 羅振釗;Annexin-1促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞M2型轉(zhuǎn)換保護(hù)缺血損傷神經(jīng)元的機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2013年

9 丁惠;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞促進(jìn)宮頸癌淋巴管生成的機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2013年

10 劉灝;巨噬細(xì)胞再極化[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王曉龍;miR-146a，miR-155在食管鱗癌中的表達(dá)及臨床意義[D];鄭州大學(xué);2013年

2 楊曉瑋;Tfh細(xì)胞促進(jìn)血吸蟲(chóng)感染小鼠肝臟蟲(chóng)卵肉芽腫形成的機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

3 劉黎;CVB3誘導(dǎo)不同性別BALB/c小鼠巨噬細(xì)胞差異性極化的機(jī)制[D];蘇州大學(xué);2013年

4 黃莉;不同巨噬細(xì)胞條件培養(yǎng)液對(duì)肝癌細(xì)胞作用及分泌蛋白質(zhì)組比較[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

5 范元春;同種異體NK細(xì)胞與人上皮性卵巢癌細(xì)胞之間的免疫編輯[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

6 馮穩(wěn);腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞與食管鱗癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及脈管生成的關(guān)系研究[D];鄭州大學(xué);2012年

7 陳芳艷;肝纖維化發(fā)生發(fā)展及逆轉(zhuǎn)過(guò)程中kupffer細(xì)胞表型的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2013年

8 李陟;嚴(yán)重燙傷大鼠外周血趨化因子及其受體表達(dá)的改變及其與炎癥介質(zhì)的關(guān)系[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

9 陳穎;LPS長(zhǎng)期刺激巨噬細(xì)胞引起適應(yīng)性免疫應(yīng)答受損[D];暨南大學(xué);2013年

10 李春燕;高脂飲食C57BL/6J小鼠脂肪組織Ym-1蛋白表達(dá)的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：1441621