本文關(guān)鍵詞：HBV感染患者外周血單個(gè)核細(xì)胞HBV DNA和cccDNA的檢測

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【摘要】：目的探討乙型肝炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)能否感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)并進(jìn)行復(fù)制。方法選取137例住院患者作為研究對象,采集血液標(biāo)本,分離提取外周血單個(gè)核細(xì)胞,使用細(xì)胞甩片法固定細(xì)胞,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(real-time quantitative polymerase chain reaction,QPCR)和滾環(huán)擴(kuò)增結(jié)合原位跨缺口原位聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)檢測HBV共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(covalently closed circular DNA,ccc DNA);免疫組織化學(xué)染色法檢測HBV DNA和HBV ccc DNA表達(dá)。結(jié)果 137例標(biāo)本中,68.6%(94/137)的標(biāo)本經(jīng)免疫組化染色后檢測出HBV DNA的表達(dá);83.9%(115/137)的標(biāo)本原位雜交和滾環(huán)擴(kuò)增PCR后檢出HBV ccc DNA陽性信號;血清HBV DNA濃度高于106 copies/ml的患者PBMC中HBV ccc DNA陽性率為95.1%,低于106 copies/ml的陽性率為51.4%。結(jié)論高濃度外周血HBV DNA是HBV感染外周血單個(gè)核細(xì)胞的危險(xiǎn)因素,通過原位聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法能夠更靈敏地檢測HBV DNA和ccc DNA在PBMC中的表達(dá),為進(jìn)一步研究證實(shí)PBMC感染導(dǎo)致HBV母嬰傳播途徑的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 解放軍疾病預(yù)防控制所全軍疾病監(jiān)測中心;解放軍302醫(yī)院臨床研究管理中心;河北北方學(xué)院檢驗(yàn)學(xué)院寄生蟲教研室;
【基金】：北京市自然科學(xué)基金(7122126)
【分類號】：R512.62
【正文快照】： (Chin J Dis Control Prev 2016,20(9):888-892)乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染目前是一個(gè)世界性的公共衛(wèi)生問題,據(jù)統(tǒng)計(jì)全球約有20億人曾感染過乙型肝炎病毒,現(xiàn)有2.4億人為慢性感染乙型肝炎患者[1]。目前,我國約有乙肝攜帶者近9 300萬人,其中慢性乙肝患者約2 000萬，

本文編號：1182241