本文關(guān)鍵詞：兩種提取銅綠假單胞菌外膜囊泡的方法比較

  更多相關(guān)文章： 銅綠假單胞菌 外膜囊泡 超濾濃縮 密度梯度離心 外毒素A IL-

【摘要】：目的對兩種方法提取的銅綠假單胞菌(PA)的外膜囊泡(OMV)的純度、產(chǎn)量及外毒素A(ETA)含量進(jìn)行比較。方法分別采取超濾濃縮法和Optiprep密度梯度離心法提取PA的OMV,負(fù)染電鏡檢測形態(tài)及純度;BCA法檢測兩種方法提取的OMV產(chǎn)量并用Western blotting對OMV中所含ETA進(jìn)行比較;建立OMV感染人肺癌上皮細(xì)胞A549模型并檢測IL-8表達(dá)水平。結(jié)果超濾濃縮法提取的OMV中存在明顯的細(xì)胞碎片、鞭毛等雜質(zhì),產(chǎn)量為21.3μg/1010個(gè)細(xì)菌,密度梯度離心提取的OMV無明顯雜質(zhì)存在,產(chǎn)量為48.7μg/1010個(gè)細(xì)菌;相比于超濾濃縮法,密度梯度離心法提取的OMV中含有更高濃度的ETA且誘導(dǎo)A549細(xì)胞產(chǎn)生更高水平的IL-8。結(jié)論 Optiripe密度梯度離心法提取的PA的OMV的產(chǎn)量和純度和ETA含量以及激活宿主細(xì)胞炎性應(yīng)答的能量均高于超濾濃縮法。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國際科技合作基地兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室兒童發(fā)育疾病研究省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院新生兒科;
【關(guān)鍵詞】： 銅綠假單胞菌 外膜囊泡 超濾濃縮 密度梯度離心 外毒素A IL-
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81071417/H2002)~~
【分類號】：R378.991
【正文快照】： 細(xì)菌的外膜囊泡(out membrane vesicle,OMV)是細(xì)菌表面分泌的雙層球形結(jié)構(gòu)[1],早在20世紀(jì)60年代,OMV就被發(fā)現(xiàn)存在于大腸桿菌的培養(yǎng)基中,但很長一段時(shí)間內(nèi)大家都只是把它當(dāng)作細(xì)菌的一個(gè)正常的代謝產(chǎn)物,直到最近,OMV的生物學(xué)功能的研究才逐漸成為了熱點(diǎn)[2]。細(xì)菌通過釋放膜囊泡

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 袁吉振;楊杰;袁文常;胡珍;尚偉龍;張霞;朱軍民;胡啟文;周人杰;饒賢才;;金黃色葡萄球菌agr基因敲除及其對膜泡毒力影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年04期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 裴斐,胡文斌;細(xì)胞信號系統(tǒng)在銅綠假單胞菌中的應(yīng)用[J];國外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊;2003年06期

2 胡曉梅,胡福泉;銅綠假單胞菌外毒素A基因表達(dá)的研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2004年03期

3 楊維青;石磊;尹曉琳;李心暉;謝軼;程曦;曾蔚;殷長甫;賈文祥;;不同地區(qū)銅綠假單胞菌第一類整合子和整合子相關(guān)基因盒的分布[J];中國抗生素雜志;2006年01期

4 樂軍;蔣曉飛;梁莉;呂元;;蛋白質(zhì)組學(xué)分析多重耐藥的銅綠假單胞菌[J];中國抗生素雜志;2006年08期

5 余瓊;高良俊;;某院銅綠假單胞菌的耐藥變遷[J];中國感染控制雜志;2007年02期

6 溫翠玲;張志華;張秀瓏;;呼吸道感染銅綠假單胞菌隨機(jī)擴(kuò)增DNA多態(tài)性分型研究[J];山東醫(yī)藥;2007年13期

7 甘曉玲;劉預(yù);;銅綠假單胞菌對碳青霉烯類抗生素的多重耐藥機(jī)制[J];重慶醫(yī)學(xué);2008年16期

8 曾燕麗;蘭小鵬;江麗;劉豐偉;李衛(wèi)濱;;滅活銅綠假單胞菌適體的篩選[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2009年01期

9 張蕓;宋英華;劉明濤;李玉;;銅綠假單胞菌RND型外排系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)藥(抗生素分冊);2010年01期

10 程小平;沈定霞;羅燕萍;周光;陳榮;權(quán)秋寧;;銅綠假單胞菌mexA基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年06期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 施凱舜;潘發(fā)憤;;銅綠假單胞菌耐藥研究進(jìn)展[A];第十次浙江省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

2 陳一強(qiáng);陳海榮;;生物膜形成相關(guān)的銅綠假單胞菌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11屆全國內(nèi)科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

3 孫衛(wèi)忠;胡曉梅;賈鳴;胡福泉;;銅綠假單胞菌噬菌體PaP1多糖水解酶的克隆表達(dá)及活性分析[A];2006中國微生物學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

4 李翔;陳輝;漆涌;徐令清;伍勇;;銅綠假單胞菌外排泵及整合子在碳?xì)涿赶╊惸退幹械淖饔肹A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

5 容冰;張文池;涂敏;;233株銅綠假單胞菌耐藥性調(diào)查[A];全國醫(yī)院感染護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會(huì)議論文匯編[C];2002年

6 任海濤;韓春茂;張嶸;徐志江;孟智啟;翁宏飚;牛寶龍;;抗菌肽Cecropin B在小鼠創(chuàng)面抗銅綠假單胞菌感染作用的研究[A];第四屆全國燒傷救治專題研討會(huì)燒傷感染救治新進(jìn)展論文匯編[C];2006年

7 秦玲;糜祖煌;;銅綠假單胞菌質(zhì)粒型AmpC酶基因的發(fā)現(xiàn)[A];第6次全國微生物學(xué)與免疫學(xué)大會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

8 宋世會(huì);田德英;陳安群;吳會(huì)玲;倪明;;mucA基因突變對銅綠假單胞菌粘液表型的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)熱帶病與寄生蟲學(xué)分會(huì)機(jī)會(huì)性感染學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2007年

9 李聰然;錢皎;王睿;;銅綠假單胞菌生物被膜密度感知系統(tǒng)分子機(jī)制的研究進(jìn)展[A];創(chuàng)新藥物及新品種研究、開發(fā)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

10 李聰然;錢皎;王睿;;銅綠假單胞菌生物被膜密度感知系統(tǒng)分子機(jī)制的研究進(jìn)展[A];2006第六屆中國藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 范曉艷;D6R：抵御細(xì)菌感染的“多面手”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

2 本報(bào)記者 薛原;生物波和生物波調(diào)控因子：為人類抗衰老開辟新領(lǐng)域(下)[N];健康報(bào);2010年

3 早報(bào)記者 李yN 實(shí)習(xí)生 劉笑;“泛耐藥菌早就存在于周圍”[N];東方早報(bào);2010年

4 北京地壇醫(yī)院主任醫(yī)師 蔡fg東;超級細(xì)菌為何接連出現(xiàn)[N];健康報(bào);2010年

5 特約記者 曉嘉;超級細(xì)菌：來勢兇猛 并非無敵[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 郭俏;銅綠假單胞菌致病因子抑制劑及喹諾酮信號分子介導(dǎo)的調(diào)節(jié)途徑研究[D];西北大學(xué);2013年

2 徐洋洋;銅綠假單胞菌致病性受信號分子調(diào)控及其機(jī)理研究[D];西北大學(xué);2013年

3 陳一強(qiáng);綠原酸對銅綠假單胞菌生物膜抑制作用及其機(jī)制的體內(nèi)外研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

4 俞鶯;常壓低溫等離子體對小鼠傷口定植綠膿桿菌的作用研究[D];華中科技大學(xué);2011年

5 王雪涵;銅綠假單胞菌dsbM基因相關(guān)研究[D];南開大學(xué);2012年

6 葉露;pvdQ基因在人腸道上皮細(xì)胞中的表達(dá)作用以及對銅綠假單胞菌致病性影響的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

7 王麗麗;銅綠假單胞菌pvdQ基因?qū)θ杭\(yùn)動(dòng)中抗生素抗性的影響及作用機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

8 龔鳳云;siRNA分子干擾銅綠假單胞菌MexAB-OprM外排泵MexB基因表達(dá)的效應(yīng)研究[D];華中科技大學(xué);2012年

9 李學(xué)如;銅綠假單胞菌耐喹諾酮類藥物的分子機(jī)制研究[D];四川大學(xué);2003年

10 張連波;密度感應(yīng)系統(tǒng)對銅綠假單胞菌致病力及生物被膜形成影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李良;銅綠假單胞菌主動(dòng)外排系統(tǒng)MexAB-OprM與碳青霉烯類藥物耐藥的關(guān)系研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 段佳麗;銅綠假單胞菌中影響RsmA調(diào)節(jié)基因的篩選及調(diào)節(jié)途徑研究[D];西北大學(xué);2011年

3 章喻軍;銅綠假單胞菌外膜耐藥和保護(hù)原功能蛋白組學(xué)的研究[D];廈門大學(xué);2007年

4 王媛;銅綠假單胞菌群體感應(yīng)調(diào)節(jié)抑制物檢測篩選系統(tǒng)的構(gòu)建[D];西北大學(xué);2007年

5 謝芬;臨床分離的銅綠假單胞菌對頭孢菌素類抗生素耐藥機(jī)制的研究[D];四川大學(xué);2006年

6 宗自衛(wèi);銅綠假單胞菌中RND外排泵基因調(diào)節(jié)及功能研究[D];西北大學(xué);2007年

7 孫瑋潔;銅綠假單胞菌群體感應(yīng)抑制物篩選系統(tǒng)的構(gòu)建及其應(yīng)用[D];西北大學(xué);2009年

8 王虎;銅綠假單胞菌耐藥性及其產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽理工大學(xué);2007年

9 陳海榮;銅綠假單胞菌生物膜形成相關(guān)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2007年

10 王s，

本文編號：984817