本文關鍵詞：中東呼吸綜合征冠狀病毒實時熒光定量PCR檢測方法的建立

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【摘要】：目的建立一種快速、敏感、特異的實時熒光定量PCR(Real-time PCR)方法,用于中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)的檢測。方法根據(jù)中東呼吸綜合征冠狀病毒S蛋白基因的保守序列設計并合成一對引物及一條特異性TaqMan探針。通過條件優(yōu)化,以10倍系列稀釋重組質(zhì)粒為標準品,進行Real-time PCR擴增,繪制標準曲線,并進行重復性、準確性、特異性及敏感性檢測。結果建立的Real-time PCR方法檢測中東呼吸綜合征冠狀病毒所繪制標準曲線的相關系數(shù)0.99,靈敏度為1.00×101拷貝,高于常規(guī)PCR方法(1.00×102拷貝);用該方法檢測中東呼吸綜合征冠狀病毒基因為陽性,其他6種對照呼吸道病原體及冠狀病毒基因檢測均呈陰性;批內(nèi)、批間重復試驗的變異系數(shù)均1%。結論建立的中東呼吸綜合征冠狀病毒Real-time PCR檢測方法靈敏、特異、重復性好,可用于中東呼吸綜合征冠狀病毒感染的快速診斷和流行病學調(diào)查。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所;吉林省人獸共患病預防與控制重點實驗室;中國農(nóng)業(yè)科學院生物技術研究所;
【關鍵詞】： 中東呼吸綜合征冠狀病毒 實時熒光定量PCR TaqMan探針 檢測方法
【基金】：國家科技支撐計劃項目(No.2013BAD12B04) 中國博士后科學基金項目(No.2013M541089)
【分類號】：R373.1
【正文快照】： 中東呼吸綜合征(Middle East respiratory syn-drome,MERS)是由中東呼吸綜合征冠狀病毒(MiddleEast respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)引起的一種高致病性、急性下呼吸道傳染病。與SARS冠狀病毒感染相似,人感染MERS-CoV后會出現(xiàn)急性、嚴重呼吸道疾病,伴有發(fā)熱、咳嗽

【相似文獻】

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本文編號：920490