本文關鍵詞：心肌組織特異性高表達核仁素轉基因小鼠的構建與鑒定

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【摘要】：目的:構建并鑒定心肌組織特異性高表達核仁素(Ncl)的轉基因小鼠,為從整體水平上研究核仁素對心肌功能的影響及其發(fā)揮心肌保護作用的機制提供動物模型。方法:采用基因重組法將小鼠核仁素基因的全長cDNA插入含心肌細胞特異性啟動子的Alpha-MyHC clone 26載體,構建Alpha-MyHC clone 26-Ncl重組載體,通過雙酶切及基因測序鑒定其正確性;采用PCR鑒定陽性小鼠并用Western blotting法觀察轉基因小鼠中核仁素的表達情況,采用組織切片及HE染色法觀察轉基因小鼠心肌組織形態(tài);測量心臟重量指數(shù)和左室壓最大上升速率,觀察核仁素在心肌組織高表達后對小鼠心臟形態(tài)功能是否有影響。結果:PCR法觀察顯示獲得4只陽性小鼠(51、52、56和86,其中52和86系繁殖良好),Western blotting結果表明轉基因小鼠的核仁素表達量明顯高于野生鼠,HE染色等結果表明核仁素對心肌形態(tài)學、心臟/體重比值及心功能無明顯影響。結論:成功制備了心肌組織特異性高表達核仁素的轉基因小鼠,與野生型小鼠相比,轉基因小鼠心肌形態(tài)及心功能無明顯差異。
【作者單位】： 中南大學湘雅醫(yī)學院病理生理教研室;
【關鍵詞】： 核仁素 轉基因 心肌 小鼠
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81170113)
【分類號】：R363
【正文快照】： 核仁素(nucleolin,Ncl)是目前發(fā)現(xiàn)的271種核仁蛋白質中含量最多的一種,約占核仁蛋白質總量 的10%⑴,是細胞內一個非常重要的具有多功能的務有限公司設計并合成核仁素PCR擴增引物,上游穿梭蛋白。研究表明,核仁素具有多種生物學功能,引物5’-AGTGAGGAAGATGCCAAAGC-3’,下游引物

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本文編號：847584